[发明专利]一种促进脐带间充质干细胞体外增殖并促进其分化的培养基

说明书

本发明公开了一种促进脐带间充质干细胞体外增殖并促进其分化的培养基。本发明发现，L‑组氨酸衍生物5具有体外促进hUC‑MSCs增值的作用，并可以诱导其成骨分化。因此，L‑组氨酸衍生物5可以用于体外制备hUC‑MSCs种子细胞并促进其成骨分化，具有制备成促进hUC‑MSCs体外增殖并诱导其成骨分化的培养基的前景。

技术领域

本发明属于干细胞领域，涉及脐带间充质干细胞体外增殖和诱导分化，具体涉及一种促进脐带间充质干细胞体外增殖并促进其分化的培养基。

背景技术

干细胞工程指在体外对干细胞进行操作，包括体外增殖、定向诱导、横向分化、基因修饰和组织成形等。其科学价值在于其诱人的应用前景，用细胞技术治疗疾病将是未来医学的发展方向。目前，干细胞工程研究的主要内容是ES细胞分离培养、定向诱导分化、基因操作、胚胎工程、核移植等，其目的是深入研究多能干细胞的分化机制，建立体外三维立体培养条件，构建不同的组织器官，开发可在体内应用的新型生物材料。

人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)是一类具有多向分化能力和自我更新能力的间充质干细胞。因脐带具有取材容易，不容易被污染，不涉及道德、伦理和法律方面的问题等诸多优点，被广泛用于hUC-MSCs的提取。而且，研究发现hUC-MSCs的体外扩增和多向分化能力比其他组织来源的间充质干细胞更强，非常适合用作干细胞工程中的种子细胞。

干细胞研究和应用首先需要解决的问题就是如何快速在体外获得大量干细胞种子细胞；其次需要解决的问题是如果诱导种子细胞向目标细胞分化。

发明内容

本发明是为了克服现有技术中存在的不足，提供一种促进脐带间充质干细胞体外增殖并促进其分化的培养基。

本发明技术方案如下：

如下化学结构的L-组氨酸衍生物在促进脐带间充质干细胞体外增殖并诱导其成骨分化方面的应用。

一种促进脐带间充质干细胞体外增殖并诱导其成骨分化的培养基，该培养基中含有如下化学结构的L-组氨酸衍生物。

有益技术效果：

本发明发现，L-组氨酸衍生物5具有体外促进hUC-MSCs增值的作用，并可以诱导其成骨分化。因此，L-组氨酸衍生物5可以用于体外制备hUC-MSCs种子细胞并促进其成骨分化，具有制备成促进hUC-MSCs体外增殖并诱导其成骨分化的培养基的前景。

附图说明

图1为L-组氨酸衍生物5的化学结构式；

图2为hUC-MSCs的表型流式鉴定图；

图3为不同浓度L-组氨酸衍生物5对hUC-MSCs的促增殖率；

图4为茜素红染色结果。

具体实施方式

下面通过具体的实施例详细介绍本发明实质性内容，但不能以此限定本发明的保护范围。

一、试验材料

DMEM/F12培养基和胎牛血清购自Gibco公司。

谷胺酰胺和双抗购自南京森贝伽生物科技有限公司。

PBS缓冲液按照配方配制后于4℃保存，24h内使用完。

Ⅳ型胶原酶和胰酶购自上海懋康生物科技有限公司，按照说明书使用。

L-组氨酸衍生物5的化学结构式如图1所示，纯度不低于98％。

二、试验方法

1、hUC-MSCs的提取培养和鉴定