[发明专利]半枝莲聚糖、提取方法及在制备抗SARS-CoV-2药物中的应用

说明书

本方案公开了医药技术领域的半枝莲聚糖、提取方法及在制备抗SARS‑CoV‑2药物中的应用。制备半枝莲聚糖时，包括以下步骤：一、将干燥的半枝莲植株粉碎得到半枝莲粉末；二、向半枝莲粉末中加入去离子水，调节其pH值至4.6～4.8得到混合液，混合液加热至50～60℃，然后加入纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶酶解35～45min，得到酶解溶液；三、将酶解溶液加热至100℃～110℃并保持1～1.2h，然后冷却过滤得到过滤液；四、将过滤液加热浓缩得到浓缩液，然后通过流动水对浓缩液透析处理2～3d得到透析液；五、将透析液加热浓缩，离心，去除沉淀后，加入上清液5～6倍体积的95％乙醇，静置过夜醇沉得到醇沉液；六、对醇沉液进行离心处理得到沉淀，沉淀用无水乙醇和丙酮交替洗涤3～5次得到半枝莲聚糖。

技术领域

本发明属于医药技术领域，特别涉及半枝莲聚糖、提取方法及在制备抗SARS-CoV-2药物中的应用。

背景技术

2019新型冠状病毒，又称SARS-CoV-2。人体感染SARS-CoV-2后的常见体征有呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等。在较严重病例中，感染可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭，甚至死亡。目前对于新型冠状病毒所致疾病没有特异治疗方法。

本次新冠肺炎病毒SARS-Cov-2属于典型的冠状病毒2-5，病毒粒子直径约60～220nm。病毒粒子外包着脂肪膜，膜表面有三种糖蛋白：刺突糖蛋白(S，Spike Protein)、小包膜糖蛋白(E，Envelope Protein)和膜糖蛋白(M，Membrane Protein)。其中，Spike蛋白是与靶细胞受体结合的位点，与靶细胞膜上的ACE2蛋白结合，具有结合细胞作用，是主要的抗原位点6-8。

S蛋白含有S1亚基和S2亚基，S1主要包含有受体结合区(receptor bindingdomain，RBD)，负责识别细胞的受体。S2含有膜融合过程所需的基本元件，包括一个内在的膜融合肽(fusion peptide)，两个7肽重复序列(heptad repeat，HR)，一个富含芳香族氨基酸的膜临近区域(membrane proximal external region，MPER)，以及跨膜区(transmembrane，TM)。

半枝莲，又名并头草、韩信草、牙刷草等，是唇形科黄芩属多年生草本植物。半枝莲全草入药，具有清热解毒、活血祛瘀、消肿止痛、抗癌等功能。性寒味酸，全草含多糖、甾族化合物、鞣质、维生素、微量元素及氨基酸等成分；有凉血解毒，散瘀止痛，消肿和清热利湿之功效。但当前未见任何关于半枝莲聚糖可用于抗SARS-CoV-2的报道。

发明内容

本发明意在提供半枝莲聚糖、提取方法及在制备抗SARS-CoV-2药物中的应用，以扩充抗SARS-CoV-2药物的来源。

本方案中的半枝莲聚糖的提取方法，包括以下步骤：

步骤一、将干燥的半枝莲植株粉碎得到半枝莲粉末；

步骤二、向半枝莲粉末中加入其12～15倍质量的去离子水，调节其pH值至4.6～4.8得到混合液，混合液加热至50～60℃，然后分别加入纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶酶解35～45min，得到酶解溶液；其中，纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶的添加量分别为半枝莲粉末质量的0.5％～0.8％、0.5％～1％、0.4％～0.7％；

步骤三、将酶解溶液加热至100℃～110℃并保持1～1.2h，然后冷却过滤得到过滤液；

步骤四、将过滤液加热浓缩得到浓缩液，然后通过流动水对浓缩液透析处理2～3d得到透析液；

步骤五、将透析液加热浓缩，离心，去除沉淀后，加入上清液5～6倍体积的95％乙醇，静置过夜醇沉得到醇沉液；

步骤六、对醇沉液进行离心处理得到沉淀，沉淀用无水乙醇和丙酮交替洗涤3～5次，洗涤后的沉淀即为半枝莲聚糖。