[发明专利]一种干酪乳杆菌及其在防治慢性胃肠炎中的应用

说明书

本申请公开了一株干酪乳杆菌及其在防止慢性胃肠炎中的应用。本申请以传统发酵乳制品‑酸马奶中分离的乳酸菌为目标菌群，经体外耐酸性试验和胆盐耐受性试验筛选出在肠道环境中生存能力较强的潜在益生菌干酪乳杆菌(Lactobacillus casei zhang)，并通过动物实验证实了其具有调节肠道菌群，提高机体免疫力，具有防治和修复慢性胃肠炎，缓解腹泻及腹部不适的功能。

技术领域

本申请涉及生物技术领域，特别涉及一种干酪乳杆菌及其在防治慢性胃肠炎中的应用。

背景技术

慢性胃肠炎是胃黏膜和肠黏膜慢性炎症。主要临床表现为食欲减退、上腹部不适、嗳气、恶心、呕吐或反复发作的腹痛、腹泻及消化不良等。因其发生部位不同，可分为慢性肠炎及慢性胃炎。

乳酸菌(Lactic acid bacteria，LAB)是一群革兰氏阳性、能发酵糖类产乳酸的细菌总称，其在自然界中广泛存在。其中的乳杆菌与人类生活关系密切，广泛应用于食品发酵，工业乳酸发酵及医疗保健领域中的有益微生物之一。乳杆菌是最重要的益生菌菌属，表现出极强的益生特性，如耐胃肠道消化液和胆盐，在胃肠液中定殖生长等等。目前尚未发现对提高机体免疫力，缓解腹泻及腹部不适等症状的乳酸菌。

发明内容

本申请的目的之一在于提供一株干酪乳杆菌zhang(Lactobacillus caseizhang)。

本申请的目的之二在于提供干酪乳杆菌zhang在防治慢性胃肠炎中的应用。

本申请的目的之三在于提供干酪乳杆菌zhang在制备防治慢性胃肠炎功能性保健品中的应用。

本申请的目的之四在于提供在制备防治慢性胃肠炎功能发酵剂、发酵乳、健康食品和动物保健制品中的应用。

本申请的目的是通过如下技术方案实现的：

本申请所述的干酪乳杆菌zhang(Lactobacillus casei zhang)分离自中国内蒙古锡林郭勒盟正蓝旗传统方法制作的酸马奶，具体地，是通过如下方法分离筛选得到的：

以自然发酵酸马奶为乳杆菌分离样品，在其发酵容器中充分搅拌后，用带有灭菌吸头的移液器，吸取2mL放入带有胶塞的灭菌小试管(15mm×150mm)中封口，再吸取1mL放入带螺旋帽并装有灭菌CaCO₃粉的无菌、容积为2mL的采样瓶中，拧紧螺旋帽作为备用样品。将收集的样品放入冰盒内冷却，保持在较低温度下带回实验室并放置于4℃冰箱内，尽快将乳酸菌进行分离。

将乳杆菌分离时，用灭菌吸管吸取1mL酸马奶样品接种于10mL灭菌石蕊牛乳培养基中，置于30℃恒温箱内增菌培养至酸化凝固，在培养基颜色变为粉红时将其取出，用灭菌接种环划线接种于含有10ppm放线菌酮和10ppm硫酸粘菌素的BL琼脂培养基(日本荣研株式会社制品)上，再放入gaspak厌氧培养罐中，置于30℃，培养48h～72h。待菌落形成后，用接种环或接种针挑取菌落，接种于TPY液体中，30℃培养24h～48h。待菌株生长良好后，再次划线接种于BL琼脂培养基中，同样置于30℃条件下，培养24h～48h，仔细观察记录菌落形态和革兰氏染色细胞形态特征，并同时进行过氧化氢酶试验。将革兰氏阳性、过氧化氢酶试验阴性的杆菌暂定为乳杆菌并进一步纯化培养，并采用冷藏、-85℃冻结保存或低温真空冷冻保存。