[发明专利]人类17个常染色体STR及28个Y染色体STR基因座复合扩增检测成套试剂与应用

说明书

本发明公开了人类17个常染色体STR及28个Y染色体STR基因座复合扩增检测成套试剂与应用。本发明公开的成套试剂由序列表中序列1‑86所示的86条单链DNA组成，序列号为偶数的单链DNA标记有荧光物质。实验证明，本发明的成套试剂所有扩增片段均小于580bp，可以用于个体识别，亲缘关系检索、分析、家系排查，对仪器设备的要求不高，并可在涉及混合、常量、微量及降解检材的案件中进行应用，个体识别率高，灵敏度高，具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中，人类17个常染色体STR及28个Y染色体STR基因座复合扩增检测成套试剂与应用。

背景技术

STR(短串联重复序列，short tendem repreat)技术最早被英国法庭科学服务部(FSS)用于案件侦破工作；第一个STR复合扩增系统包括TH01、FES\FPS、vWA和F13A1四个基因座，匹配概率约为万分之一。之后该复合系统被不断完善，系统中所包含的STR基因座数目也不断增加(从6个到10个)。与此同时，美国联邦调查局(FBI)也根据自身办案需求构建了包含13个STR基因座的联合DNA索引系统(Combined DNA Index System，CODIS)：D3S1358、vWA、FGA、D8S1179、D21S11、D18S51、D5S818、D13S317、D16S539、TH01、TPOX、CSF1PO和D7S820。在研究中，有60个常染色体STRs最为常见。

在我国，常染色体STR检验和Y-STR检验已经有很多年的历史，在过去十年，有很多常染色体STR检验和Y-STR检验的试剂盒相继被开发并应用于实战，随着DNA技术的发展，为了更好地应对恐怖袭击，个体识别、国际间数据共享等问题，对检验体系提出了更高的要求，即在一个体系内包含尽可能多的基因座位点能对混合检材、降解检材等进行有效分析。随着STR-PCR技术的发展，越来越多的复合扩增体系被研究开发，这些复合体系一般包含24-27个基因座位点。公安部物证鉴定中心最先开始了常染色体STRs试剂的研发工作，先后推出了DNAtyper15，DNAtyper19，DNAtyper21等试剂盒及其标准物质，不仅为公安机关侦查破案、DNA数据库建设提供了强有力的支持，还打破了国外常染色体STRs试剂的垄断地位，引领了国内常染色体STRs试剂的研发和生产。常染色体STRs检验由于能达到同一认定，因此在个体识别、亲缘关系鉴定中发挥了重要作用，在案件侦破中，常染色体STRs检验在证据链中有着举足轻重的作用，因此常染色体STRs检验被广泛应用于案件侦破中，此外，在我国DNA数据库样本检验中，常染色体STRs检验仍然是重点，目前我国的DNA数据库总量已经达到8000万，为案件的比对及串并提供了有力支持。目前国内外有多家公司都有常染色体STRs试剂盒，比如AB、Promega、中德美联、阅微、海尔施等。

近年，Y-STRs检验的价值和作用逐渐显现，到目前为止，有48个Y-STRs最为常见，Y-STRs由于其特殊的遗传特点，常用于家系排查、亲缘关系检索(父系)，可以为案件侦破提供线索、确定侦查范围，特别是随着“甘肃白银杀人案”、“山西绛县杀人案”的侦破，Y-STRs一度成为研究热点，各地公安机关也在规划建立Y-STRs数据库，其中河南的Y-STRs数据库建设最早，为案件侦查提供了保障。公安部物证鉴定中心对Y-STR检验体系也进行了研究和开发，目前有DNAtyperY29复合扩增体系，已经广泛应用于案件检验和Y建库中。

常染色体STRs检验的优势在于同一认定，但是不能单独用在家系排查中，而Y-STRs在家系排查中有优势，但是不能单独用于个体识别和亲缘关系分析，因此如果将常染色体STRs和Y-STRs结合在一起，既可以实现个体识别、亲缘关系分析，又可以达到家系排查的目的。但是目前的多个联合常染色体STR、Y-STR的复合扩增体系存在着如下问题：Y-STR位点少，在家系排查中的应用价值不大；部分位点的片段达到了650bp，在微量及降解检材检验中存在不足；对检测仪器有较高要求。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何检测人类待测样本是否来源于同一个体及同一家系。