[发明专利]一种猪痢疾雾化疫苗及其制备方法在审
申请号: | 202010411769.8 | 申请日: | 2020-05-15 |
公开(公告)号: | CN111544582A | 公开(公告)日: | 2020-08-18 |
发明(设计)人: | 倪博;袁朗 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
主分类号: | A61K39/02 | 分类号: | A61K39/02;A61K9/12;A61K39/39;A61P31/04 |
代理公司: | 芜湖众汇知识产权代理事务所(普通合伙) 34128 | 代理人: | 曹宏筠 |
地址: | 210000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种猪 痢疾 雾化 疫苗 及其 制备 方法 | ||
1.一种猪痢疾雾化疫苗,包括:猪痢疾短螺旋体的至少两种基因多样性菌株的细菌的组合物,其特征在于:所述基因多样性是通过不同克隆复合体筛选来自猪痢疾短螺旋体的至少两种基因多样性菌株而获得的,且其中至少一个菌株属于克隆复合体I或克隆复合体Ⅱ或克隆复合体Ⅲ。
2.根据权利要求1所述一种猪痢疾雾化疫苗,其特征在于:所述细菌的组合物为灭活细菌,且细菌的组合物的浓度为108至109总细菌数/mL。
3.根据权利要求1所述一种猪痢疾雾化疫苗,其特征在于:所述基因多样性菌株在总检测菌株的比例为至少1%。
4.根据权利要求1所述一种猪痢疾雾化疫苗,其特征在于:所述基因多样性菌株的细菌的组合物内含有佐剂,且佐剂为铝盐和矿物油,所述佐剂与基因多样性菌株的细菌的组合物的比例为9:1。
5.根据权利要求1所述一种猪痢疾雾化疫苗,其特征在于:所述基因多样性菌株的细菌的组合物中至少有一个菌株属于克隆复合体I或克隆复合体Ⅱ或克隆复合体Ⅲ。
6.根据权利要求1所述一种猪痢疾雾化疫苗的制备方法,其特征在于:所述制备方法包括以下步骤:
步骤1:猪痢疾短螺旋体的采集:将健康易感染的家猪接种猪痢疾短螺旋体,无菌采集接种后24~72h濒死或刚死亡的且具有典型病理变化的肠道组织经检验合格后,保存作为生产用;
步骤2:基因多样性菌株的细菌的组合物悬浮液的制备:取生产用无菌条件下称量采毒的肝脏组织,加适量的pH7.2磷酸盐缓冲液或生理盐水进行捣碎或研磨、过滤后得组织悬液,按组织悬液总量的0.1%~0.5%加入甲醛溶液,充分混合后装入无菌容器中,密封后置37℃环境下灭活48h,得到基因多样性菌株的细菌的组合物悬浮液;
步骤3:猪痢疾雾化疫苗的配制:在步骤2所得的基因多样性菌株的细菌的组合物悬浮液中添加佐剂,佐剂成分为铝盐和矿物油,按照佐剂与基因多样性菌株的细菌的组合物的比例为9:1进行配苗,将基因多样性菌株的细菌的组合物悬浮液与佐剂进行充分搅拌混合,既得猪痢疾疫苗溶液。
步骤4:取步骤3所得的猪痢疾疫苗溶液,将该溶液加入医用下呼吸道沉积型喷雾器中,将喷雾器连接空气压缩泵,调节压力为0.2MPa后进行喷雾,制备猪痢疾雾化疫苗。
7.根据权利要求6所述一种猪痢疾雾化疫苗的制备方法,其特征在于:所述步骤4所得猪痢疾雾化疫苗通过肠胃外进行给药,猪在断奶后2周进行疫苗接种且猪在首次疫苗接种后两周进行再次疫苗接种。
8.根据权利要求6所述一种猪痢疾雾化疫苗的制备方法,其特征在于:所述猪痢疾雾化疫苗向猪给药的每剂总细菌数在108至109个细菌之间。
9.根据权利要求6所述一种猪痢疾雾化疫苗的制备方法,其特征在于:所述步骤2中,使用甲醛溶液对收获的细胞培养物进行灭活处理;并对灭活后的基因多样性菌株的细菌的组合物悬浮液进行灭活检验:灭活液接种细胞后无细胞病变。
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