[发明专利]一种复方红衣补血口服液中6种多酚类化合物的含量测定方法

权利要求书

1.一种复方红衣补血口服液中6种多酚类化合物的含量测定方法,所述多酚类化合物为咖啡酸、没食子酸、对羟基肉桂酸、阿魏酸、儿茶素和表儿茶素，其特征在于，所述含量测定方法为UPLC法。

2.如权利要求1所述的复方红衣补血口服液中6种多酚类化合物的含量测定方法,其特征在于，所述含量测定方法包含如下步骤：

(1)色谱条件与系统适用性试验；

(2)混合对照品溶液的制备；

(3)供试品溶液的制备；

(4)测定法。

3.如权利要求2所述的复方红衣补血口服液中6种多酚类化合物的含量测定方法,其特征在于，所述色谱条件与系统适用性试验为:

色谱柱：Waters Symmetry C₁₈(4.6mm×150mm，3.5μm)；流动相：甲醇(A)-0.1％甲酸溶液(B)，梯度洗脱，洗脱程序见下表；流速：0.5mL/min；检测波长：250nm(咖啡酸、没食子酸、对羟基肉桂酸、阿魏酸)、280nm(儿茶素、表儿茶素)；柱温：30℃；进样量：5μL；在该色谱条件下，6种成分峰形正态，且与相邻色谱峰的分离度均大于1.5，均达到基线分离，理论板数均大于10000；

4.如权利要求3所述的复方红衣补血口服液中6种多酚类化合物的含量测定方法,其特征在于，所述250nm波长下检测咖啡酸、没食子酸、对羟基肉桂酸、阿魏酸；所述280nm波长下检测儿茶素、表儿茶素。

5.如权利要求3所述的复方红衣补血口服液中6种多酚类化合物的含量测定方法,其特征在于，所述Waters Symmetry C₁₈色谱柱的规格为4.6mm×150mm，3.5μm。

6.如权利要求3所述的复方红衣补血口服液中6种多酚类化合物的含量测定方法,其特征在于，所述对照品溶液的制备方法为：

精密称取咖啡酸对照品117mg、没食子酸对照品11mg、对羟基肉桂酸对照品13mg、阿魏酸对照品31mg、儿茶素对照品90mg、表儿茶素对照品13mg，分别置于50mL量瓶中，加甲醇溶解并定容，摇匀，制得对照品贮备溶液。精密量取上述对照品贮备溶液各1mL，置100mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得混合对照品溶液。

7.如权利要求3所述的复方红衣补血口服液中6种多酚类化合物的含量测定方法,其特征在于，所述供试品溶液的制备方法为：精密量取样品1ml，通过AB-8型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长12cm)，以水70mL洗脱，弃去水液，再用70％乙醇50mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转至100mL量瓶中，并定容至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

8.如权利要求3所述的复方红衣补血口服液中6种多酚类化合物的含量测定方法,其特征在于，所述含量测定方法详细步骤为：

(1)色谱条件与系统适用性

色谱柱：Waters Symmetry C₁₈(4.6mm×150mm，3.5μm)；流动相：甲醇(A)-0.1％甲酸溶液(B)，梯度洗脱，洗脱程序见下表；流速：0.5mL/min；检测波长：250nm(咖啡酸、没食子酸、对羟基肉桂酸、阿魏酸)、280nm(儿茶素、表儿茶素)；柱温：30℃；进样量：5μL；在该色谱条件下，6种成分峰形正态，且与相邻色谱峰的分离度均大于1.5，均达到基线分离，理论板数均大于10000；

(2)混合对照品溶液的制备

精密称取咖啡酸对照品117.85mg、没食子酸对照品11.00mg、对羟基肉桂酸对照品13.80mg、阿魏酸对照品31.80mg、儿茶素对照品90.75mg、表儿茶素对照品13.05mg，分别置于50mL量瓶中，加甲醇溶解并定容，摇匀，制得对照品贮备溶液；精密量取上述对照品贮备溶液各1mL，置100mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得浓度分别为23.50、2.00、2.70、6.30、18.00和2.60μg/mL的混合对照品溶液；

(3)供试品溶液的制备精密量取样品1ml，通过AB-8型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长12cm)，以水70mL洗脱，弃去水液，再用70％乙醇50mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转至100mL量瓶中，并定容至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。