[发明专利]一种诱导胶质细胞转分化为功能性神经元的方法及其应用

权利要求书

1.一种Neurog2功能性片段的用途，其特征在于，(i)用于制备神经诱导胶质细胞形成功能性神经元细胞的药物组合物；和/或(ii)用于制备针对神经系统疾病的药物组合物。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的胶质细胞选自人或非人哺乳动物的星形胶质细胞、NG2胶质细胞、少突胶质细胞或小胶质细胞；优选地，所述的胶质细胞为星形胶质细胞。

3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述的胶质细胞来源于脊髓、背侧中脑或大脑皮层；较佳地，所述的胶质细胞来源于脊髓和背侧中脑；其中，所述的胶质细胞为正常状态或损伤状态下的胶质细胞。

4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的Neurog2功能性片段为具有功能性的Neurog2蛋白或编码Neurog2的核酸序列：

其中，所述的Neurog2蛋白与SEQ ID NO.:1或SEQ ID NO.:3的序列同源性不低于83％；更优地，所述的Neurog2蛋白与SEQ ID NO.:1的序列同源性不低于90％；最优地，所述的Neurog2蛋白与SEQ ID NO.:1的序列同源性不低于95％；

所述的编码Neurog2的核酸序列与SEQ ID NO.:2或SEQ ID NO.:4的序列同源性不低于80％；更优地，所述的编码Neurog2的核酸序列与SEQ ID NO.:2的序列同源性不低于90％；最优地，所述的编码Neurog2的核酸序列与SEQ ID NO.:2的序列同源性不低于95％。

5.一种载有Neurog2功能性片段的递送系统，其特征在于，所述的递送系统应用于体内或应用于体外，诱导胶质细胞转分化为功能性神经元；所述的胶质细胞为正常状态或损伤状态下的胶质细胞。

6.如权利要求5所述的递送系统，其特征在于，所述的递送系统为病毒载体，选自腺相关病毒载体、腺病毒载体、逆转录病毒载体或慢病毒载体。

7.如权利要求6所述的递送系统，其特征在于，所述病毒载体至少包含胶质细胞特异性的启动子和Neurog2功能性片段。

8.如权利要求7所述的递送系统，其特征在于，所述的病毒载体的启动子选自GFAP启动子、NG2启动子、Aldh1L1启动子、IBA1启动子、CNP启动子、LCN2启动子或经过基因工程改造后的启动子变体；优选地，所述的病毒载体为GFAP-AAV载体或NG2-慢病毒载体。

9.一种载有Neurog2功能性片段的宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞来源于体外培养的胶质细胞或体内正常状态下或损伤状态下的胶质细胞的转分化，并形成有功能的神经元或有功能的神经元细胞群；

其中，所述有功能的神经元具有以下特征：

(a)表达神经元的标志物NeuN；

(b)发放动作电位并形成突触联系；

所述有功能的神经元细胞群具有以下特征：

(a)至少50％的神经元细胞，优选至少60％、70％、80％、90％或100％的神经元细胞表达成熟神经元的标志物NeuN；

(b)发放动作电位并形成突触联系。

10.如权利要求5-8的任一递送系统或如权利要求9所述的宿主细胞的应用，其特征在于，所述的递送系统或所述的宿主细胞用于制备针对神经系统损伤与神经修复的药物组合物，所述的药物组合物还包含有药学上可接受的载体。