[发明专利]负载Survivin双抑制剂的铁蛋白纳米颗粒及其制备方法和应用

权利要求书

1. 一种负载Survivin双抑制剂的铁蛋白纳米颗粒，其特征在于，所述双抑制剂包括小分子抑制剂YM155和蛋白抑制剂TmSm，以人铁蛋白重链亚基FTH1作为蛋白载体，TmSm通过基因工程的手段串联融合到FTH1 单体的C端，YM155包裹于纳米颗粒的中空内腔。

2.权利要求1所述一种负载Survivin双抑制剂的铁蛋白纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）以人铁蛋白重链亚基FTH1作为蛋白载体，选取MMP-2敏感肽作为酶切割识别位点，选取柔性肽(G4S)₂作为连接肽，利用重叠延伸PCR的方法融合成重组基因FTH1-Linker-MMP2-TmSm，命名为FTS；

（2）取适量步骤（1）制备的FTS蛋白包涵体溶解液，将YM155储备液加入蛋白溶液中，FTS纳米颗粒与YM155摩尔比为1：10-1：200，混合物在2-8℃搅拌30-120min；

（3）将混合液放入预处理的透析袋中，按照1：10的体积逐级放入4mol/L尿素的透析液A、2mol/L尿素的透析液B、1mol/L尿素的透析液C和0mol/L尿素的透析液D中；

（4）透析结束后，透析溶液在2-8℃，10,000-14,000rpm离心10-30min，收集上清液，超滤管浓缩，滤膜无菌过滤。

3.根据权利要求2所述的一种负载Survivin双抑制剂的铁蛋白纳米颗粒的制备方法，其特征在于，步骤（1）混合物在4℃搅拌60min。

4. 根据权利要求2所述的一种负载Survivin双抑制剂的铁蛋白纳米颗粒的制备方法，其特征在于，步骤（1）FTS 纳米颗粒与YM155摩尔比为1：200。

5.根据权利要求2所述的一种负载Survivin双抑制剂的铁蛋白纳米颗粒的制备方法，其特征在于，步骤（4）透析溶液在4℃，12,000rpm离心20min。

6.权利要求1所述一种负载Survivin双抑制剂的铁蛋白纳米颗粒在制备治疗肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述肿瘤为Survivin过表达的肿瘤，包括肺癌、胰腺癌、肝癌、乳腺癌以及膀胱癌。