[发明专利]一种对绿光敏感的光敏蛋白质粒的设计方法在审
申请号: | 202010389609.8 | 申请日: | 2020-05-08 |
公开(公告)号: | CN111690683A | 公开(公告)日: | 2020-09-22 |
发明(设计)人: | 郑斌;郭明明;明东;甘霖;刘爽 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N15/864 | 分类号: | C12N15/864;C12N15/31 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 程小艳 |
地址: | 300072*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 敏感 光敏 蛋白 质粒 设计 方法 | ||
1.一种对绿光敏感的光敏蛋白质粒的设计方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)制备上转换纳米颗粒;
2)寻找合适的NpHR基因序列,合成NpHR,构建质粒hSyn-eNpHR-eYFP;
3)检测重组质粒的表达情况,检测NpHR;
4)用AAV包装将连接好的质粒,检测包装情况;
5)用膜片钳检测细胞膜两侧的电位变化。
2.根据权利要求1所述的一种对绿光敏感的光敏蛋白质粒的设计方法,其特征在于,所述步骤3)构建质粒hSyn-eNpHR-eYFP。
3.根据权利要求1所述的一种对绿光敏感的光敏蛋白质粒的设计方法,其特征在于,所述步骤3)构建质粒mCaMKⅡa-eNpHR-eYFP。
4.根据权利要求1所述的一种对绿光敏感的光敏蛋白质粒的设计方法,其特征在于,所述步骤3)构建质粒hSyn-eNpHR-mCherry。
5.根据权利要求1所述的一种对绿光敏感的光敏蛋白质粒的设计方法,其特征在于,NpHR基因序列:
Atcatcagccggggtcccagaagcagatggaacatccaaaatgctgccggacacgacagattcgtttgacgtcagatagttcaggagcaagaatgcgaaaatgtactttgccacgatatccaggaaagaatatccccagctcgtcaccccaacgggcaacaccgcgataccctcgactccaagagcccacacaattggataccccagccacatcactactgtcaacagcttcagggtattgaacatgtcagcggttcccgcggctttggcgtcctgtgcccactccaccagcaggatatacaagaccaccagaaagcatgcacaactgatagcgtaccagaaccatctcatgaggtgggaggaggtagtcagggccgcggcaaggccagtcacgcacatagcgatatcgaaagtgatagctgtgaagagctttgtagcattgcttccggccaggagacccagagcgaggagaatcatgggcgtggaaagtgcccaggtgagataccgtccccacatggtgactacaccatctacctcttctcctcccagcatcactgagctgccttctgcaaaatggcccgctggcatttcaagaacggaaattgtcaggccgctcgccaatccagtgtaggaggcaatgctgacgacaggcacaaggatggttgacacagcaataagttttgcccgtggatcatcgagtcctcgggtcataaaaacgaacagcagtatactcagtcctgcaagtgcgatgttgatatagagactgcttgcaagcaaagggtcgttcagcacgaactcgaacaactccctttgggtaacctcggcttgaagggccacggcactct。
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