[发明专利]一种外泌体分离纯化装置及其分离纯化方法

权利要求书

1.一种外泌体分离纯化装置，其特征在于，包括上微流控芯片、过滤膜和下微流控芯片，所述过滤膜设置在上微流控芯片和下微流控芯片之间，所述上微流控芯片上和下微流控芯片上分别设置有两个进口，通过所述上微流控芯片的其中一个进口向内注入样本液体，经过所述过滤膜过滤后，从所述下微流控芯片的其中一个进口获得外泌体。

2.如权利要求1所述的外泌体分离纯化装置，其特征在于，所述上微流控芯片包括第一进口和第二进口，所述下微流控芯片包括第三进口和第四进口，所述上微流控芯片和下微流控芯片的两个进口之间都设置有蛇形通道，所述蛇形通道为均匀间隔设置。

3.如权利要求2所述的外泌体分离纯化装置，其特征在于，所述蛇形通道的宽度为0.4-0.6um，深度为0.08um，蛇形通道之间的间距为0.4-0.6um。

4.如权利要求1-3任一项所述的外泌体分离纯化装置，其特征在于，所述过滤膜为PCTE过滤膜，所述过滤膜的孔径为100-800nm。

5.如权利要求1-4任一项所述的外泌体分离纯化装置，其特征在于，所述上微流控芯片的进口连接有注液管，所述下微流控芯片的进口连接有排液管，所述注液管和排液管均为无菌软管，所述注液管尺寸为0.6*1.6mm，所述排液管尺寸为1.0*1.6mm。

6.如权利要求1-5任一项所述的外泌体分离纯化装置，其特征在于，所述上微流控芯片和下微流控芯片的整体尺寸为24mm*29.3mm，所述蛇形流道的整体尺寸为12mm*12mm。

7.一种采用权利要求1-6所述外泌体分离纯化装置的分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将上微流控芯片和下微流控芯片的其中一个进口分别堵住，向上微流控芯片的畅通的进口中，以10ul/min的流速将待测液体样本注入上微流控芯片；

(2)待测液体样本通过上微流控芯片后，进入过滤膜过滤，去除污染物，并富集外泌体，过滤后的待测液体样本从下微流控芯片的畅通进口中流出；

(3)向上微流控芯片的畅通的进口中，以100ul/min的流速通入空气，完全排除通道内的液体；

(4)再向上微流控芯片的畅通的进口中，以50ul/min的流速通入去离子水到上微流控芯片和下微流控芯片，从所述下微流控芯片的进口处收集外泌体。

8.如权利要求7所述的分离纯化方法，其特征在于，还包括以下步骤：

(5)步骤1中分别堵住上微流控芯片的第二进口和下微流控芯片的第三进口，在执行完步骤(4)之后，再从第一进口以100ul/min的流速通入空气，完全排除通道内的液体；

(6)然后堵住第一进口和第四进口，再松开所述第二进口和第三进口，从所述第三进口以1ul/min的流速通入去离子水，反向冲洗，将截留的外泌体洗脱出来，通过所述第二进口收集外泌体用于后续的表征。

9.如权利要求8所述的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤(4)中通入3-6ml去离子水。

10.如权利要求9所述的分离纯化方法，其特征在于，在收集外泌体时采用纳米膜收集，直接将外泌体收集在纳米膜上，以用于质谱检测。