[发明专利]植物转基因筛选载体pCALSm1及其应用

说明书

本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及植物转基因筛选载体pCALSm1及其应用。本发明提供的植物遗传转化筛选载体利用包含水稻乙酰乳酸合成酶突变基因的表达盒作为筛选标记，在愈伤组织筛选阶段使用嘧啶水杨酸类、咪唑啉酮类等除草剂作为筛选剂，所获得的转基因植株具备对嘧啶水杨酸类、咪唑啉酮类等除草剂的高抗性。该载体可作为转基因筛选载体附加其他功能元件使用，在转基因过程中利用植物内源基因，不引入菌源等外源筛选标记基因，不仅丰富了植物转基因筛选方法，还可有效降低外源基因引起的转基因植物的潜在安全风险以及公众对转基因植物的担忧，有利于转基因植物的商业化应用，市场价值和社会效益均良好。

技术领域

本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及植物转基因筛选表达盒、含有该表达盒的植物转基因筛选载体及其应用。

背景技术

随着基因工程和分子生物学技术的迅速发展，转基因技术的应用范围越来越广泛。转基因技术具有诸多的优点，如可拓宽可利用的基因资源，创造新种质资源；可对植物性状进行定向定点变异和选择；为培育高产、优质、高抗优良品种提供新途径等。转基因作物于1996年被批准商业化种植，截至2017年，全球累计批准23种转基因作物进行商业化生产，涉及包括抗虫、抗除草剂、抗病、育性改变、品质改良等在内的超过16类目标性状。据统计，2017年全球26个国家和地区种植以抗除草剂和抗虫为主的大豆、玉米、棉花、油菜等转基因作物，面积达1.9亿公顷。转基因作物的大面积推广，为全球农业生产做出了巨大贡献。

目前，随着转基因产品的不断推广，人们对转基因产品的态度日趋客观和积极，但对转基因产品的争议仍甚嚣尘上，转基因产品潜在的安全风险问题仍受到普遍关切，因此，转基因产品需要严格的控制和监管。对于转基因作物的争议关键之一是筛选标记可能带来的潜在风险，其转入植物后对靶标生物的抗性、所表达蛋白质的致敏性以及对受体作物本身营养成分、天然毒素和抗营养物质含量等方面的影响是未知的。目前使用最多的是抗生素类和除草剂类筛选标记，如潮霉素-HPT筛选系统、卡纳霉素-NPTII筛选系统、草丁膦-Bar筛选系统等。这些筛选标记绝大多数为细菌等来源的外源基因，这也是引起公众担忧的原因之一。如果能用植物内源的基因作为筛选标记重新转化植物则可去除外源基因引起的风险和担忧。