[发明专利]MS-275作用于急性心肌缺血再灌注损伤的研究方法

权利要求书

1.MS-275作用于急性心肌缺血再灌注损伤的研究方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：通过对SD雄性大鼠进行左冠状动脉前降支结扎，建立大鼠急性MI/RI模型；

步骤二：观察MS-275在大鼠MI/RI急性期中的作用；

步骤三：探讨MS-275对大鼠MI/RI保护作用的分子机制。

2.根据权利要求1所述的MS-275作用于急性心肌缺血再灌注损伤的研究方法，其特征在于：所述的步骤一包括：将SD雄性大鼠72只随机分为4组，每组18只：其中第一组为假手术组(Sham组)，只穿线不结扎；第二组为缺血30分钟组(I 30min组)；第三组为缺血30分钟再灌注60分钟组(I/R 60min组)；第四组为缺血30分钟再灌注2小时组(I/R 120min组)；实验结束后，处死大鼠，分离心脏，留取心肌梗死区组织标本，切片染色观察心肌梗死范围及心肌梗死区细胞组织形态变化，并通过免疫组化、组蛋白乙酰化检测试剂盒及real-time PCR等技术检测组蛋白乙酰化水平、HDAC1及miR-210的表达改变。

3.根据权利要求1所述的MS-275作用于急性心肌缺血再灌注损伤的研究方法，其特征在于：所述的步骤二包括：将SD雄性大鼠90只随机分为3组，每组30只：第一组为假手术组(Sham组)，只穿线不结扎，分别于手术前24小时、1小时腹腔注射溶媒DMSO；第二组为心肌缺血/再灌注组(I/R组)，分别于手术前24小时、1小时腹腔注射溶媒DMSO；第三组为心肌缺血/再灌注+HDACI预处理组(I/R+MS-275组)，分别于手术前24小时、1小时腹腔注射MS-275(10mg/kg)；缺血/再灌注时间为30min/120min，实验过程中监测各组大鼠血流动力学及心律失常情况；实验结束后，处死大鼠，分离心脏，留取心肌梗死区组织标本，切片染色观察心肌梗死范围及心肌梗死区细胞组织形态变化，并检测组蛋白乙酰化水平、HDAC1及miR-210的表达改变。

4.根据权利要求1所述的MS-275作用于急性心肌缺血再灌注损伤的研究方法，其特征在于：所述的步骤三包括：利用生物信息学、双荧光素酶报告基因系统、干扰过表达等方法，筛选并鉴定miR-210的下游靶基因FOXO3A；MS-275处理H9c2细胞株，检测处理前后miR-210启动子区组蛋白H4ac水平、miR-210和FOXO3A的表达以及细胞凋亡情况；分析大鼠缺血再灌注心肌梗死区组织中miR-210与FOXO3A表达的相关性；通过靶基因回复性实验证实miR-210/FOXO3A介导MS-275的心肌保护作用。