[发明专利]谷氨酸转运体-1基因转染胶质细胞在治疗创伤性脑损伤方面的应用

说明书

本发明公开了谷氨酸转运体‑1（GLT‑1）基因转染胶质细胞在治疗创伤性脑损伤（TBI）方面的应用，其特征在于，通过在体动物实验，在使用谷氨酸转运体‑1基因转染胶质细胞情况下，检测谷氨酸转运体‑1基因转染胶质细胞对大鼠神经细胞凋亡、学习记忆功能的影响。本发明还公开了谷氨酸转运体‑1基因转染胶质细胞在制备创伤性脑损伤的预后药物中的应用，本发明应用谷氨酸转运体‑1基因转染胶质细胞治疗TBI，减少TBI后谷氨酸的兴奋性毒性对神经细胞的不利影响，从而恢复TBI患者的神经功能；为治疗创伤性脑损伤提供新的方向，同时为制备治疗创伤性脑损伤的预后药物，提供研究基础。

技术领域

本发明属于生物医疗研究技术领域，具体涉及谷氨酸转运体-1（GLT-1）基因转染胶质细胞在治疗创伤性脑损伤方面的应用、谷氨酸转运体-1（GLT-1）基因转染胶质细胞在制备创伤性脑损伤的预后药物中的应用。

背景技术

随着国民经济的发展，交通事业日益发达，随之而来的交通事故也逐年增多，由此引起的创伤性脑损伤（traumatic brain injury,TBI）亦十分常见。TBI是以细胞丢失为主要特征的进行性退行性病变，其脑损伤的机制有：首先是弥漫性的细胞死亡；然后是继发性细胞损伤，主要是细胞的凋亡；最后，激活的星形胶质细胞形成胶质斑痕。TBI发生后常危及患者生命，即使经抢救能挽回生命，但往往伴有肢体残疾、癫痫或学习、记忆等认知功能障碍，甚至成为植物人丧失生活自理能力，严重影响患者的生活质量并给社会和家庭带来沉重的负担。

参与继发性脑损伤的因素中，兴奋性氨基酸毒性作用日益受到重视。越来越多的文献表明，创伤性脑损伤后脑组织细胞外谷氨酸（L-glutamate）水平较高，且其升高的程度及持续的时间与伤后肢体运动、认知功能的恢复呈负相关。

谷氨酸在中枢神经系统内分布极为广泛，中枢神经系统内大多数兴奋性突触都以谷基酸为递质。几乎所有的神经元都具有相对应的谷氨酸受体。其受体分为离子型和代谢型两种，离子型受体主要为NMDA受体和AMPA受体，代谢型受体又可分为mGluR1～8个亚型，谷氨酸与相关受体结合从而发挥不同的生理功能，比如兴奋性突触传递、脑发育、突触可塑性和学习记忆等。

急性中枢神经系统疾病如脑缺血和脑损伤时， 谷氨酸的释放和摄取过程发生异常，引起细胞外微环境中谷氨酸升高，过多的谷氨酸会导致兴奋毒性作用，这是导致细胞死亡的主要机制。兴奋毒性是指过多的兴奋性氨基酸会对神经元造成毒性作用。目前认为谷氨酸的兴奋毒性主要由NMDA受体来介导，通过其下游的信号通路来实现的。下游的信号通路使得胞内钙离子浓度升高，进而产生大量的活性氧分子、氧自由基、一氧化氮以及高活性的过硝基化合物等有害物质，且过多消耗胞内的ATP，从而引起神经元的死亡。进而引起病人愈后差，出现肢体残疾、认知功能障碍等。目前，针对谷氨酸的兴奋毒性的药物治疗研究，主要集中在NMDA受体的拮抗剂方面，但是阻断NMDA受体的同时，也阻断了谷氨酸众多的生理功能，出现较多的不良副反应。那么，能否另辟蹊径来降低谷氨酸的兴奋毒性呢。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种谷氨酸转运体-1（GLT-1）基因转染胶质细胞在治疗创伤性脑损伤方面的应用，以解决背景技术中的问题。

为解决上述技术问题，本发明的实施例提供谷氨酸转运体-1基因转染胶质细胞在治疗创伤性脑损伤方面的应用。

进一步的，谷氨酸转运体-1基因转染胶质细胞在治疗创伤性脑损伤方面的应用，其特征在于，通过在体动物实验，在使用谷氨酸转运体-1基因转染胶质细胞情况下，检测谷氨酸转运体-1基因转染胶质细胞对大鼠神经细胞凋亡、学习记忆功能的影响。

其中，所述在体动物实验，具体包括以下步骤：

（1）采用颅脑液压损伤装置制备大鼠TBI模型；

（2）构建GLT-1腺病毒载体（AAV-GLT1），注入损伤区皮质；