[发明专利]选择育种方法

权利要求书

1.肉兔育种方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)选取日本大耳白兔为父本，德国花巨型兔为母本，进行人工授精，得到杂交一代F1；

(2)选取步骤(1)得到的杂交一代F1的雌性兔为母本，德国花巨型兔为父本，进行人工授精，得到杂交二代F2；

(3)将步骤(2)得到的杂交二代F2与德系安哥拉兔进行杂交，得到杂交三代F3；

(4)从步骤(3)得到的杂交三代F3进行横交固定，得到高代杂种兔；

其中，在每个步骤的杂交或横交之前的兔子选择时，对兔子进行抽血检测，检测其CETP基因；

建立兔CETP基因多态性与肉质之间的关联关系，其包括以下步骤：

(1)在日本大耳白兔、德国花巨型兔和德系安哥拉兔的屠宰过程中，选取肉质指标和/或物理形态较好的兔子，选取肌肉或血液的组织样，并提取样品DNA，每只兔的DNA样要与其耳标号相对应；

(2)由DNA样合成包含标记基因即CETP基因与兔子的肉质指标和/或物理形态相关的SNP位点的特定引物；

(3)模板PCR扩增引物：将2×TaqPCRMasterMix、ddH₂O、引物、模板DNA混合构建成PCR反应体系，其中2×Taq PCR MasterMix为5μL、ddH₂O为3.2μL、引物为0.8μL、模板DNA为0.8μL；混合均匀后，进行PCR扩增，获得扩增产物；所述的模板PCR扩增引物采用的是混合法；所述PCR扩增的程序为92℃下预变性5min后，转入35个循环的延伸前扩增程序，待35个循环完成后，在72℃下延伸10min，即可获得扩增产物；

(4)基因型判定与分型：将扩增产物在99℃下变性5min后，置于10％的聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳，电泳完毕后，进行硝酸银染色拍照，并根据电泳结果直接判定个体基因型；

(5)不同基因型个体PCR产物的测序验证：对不同基因型个体各5个50μL扩增体系，经琼脂糖凝胶检测，有目的条带后，进行基因纯化测序；记录各个个体的基因型，均与肉质指标和/或物理形态、DNA样、个体标号要一一对应；

(6)个体MBLUP遗传评估：将各个个体的系谱、年龄、性别、基因型以及肉质指标和/或物理形态体重信息纳入标记辅助BLUP模型估计出各个个体的育种值，建立兔CETP基因多态性与肉质指标和/或物理形态之间的关联关系。

2.根据权利要求1所述的肉兔育种方法，其特征在于，在所述步骤(1)之前建立种兔子育种基因模型。

3.根据权利要求2所述的肉兔育种方法，其特征在于，所述兔子育种基因模型包括兔子基因中的CETP基因与兔子肉质指标和/或物理形态之间的关联关系。

4.根据权利要求3所述的肉兔育种方法，其特征在于，所述物理形态包括体重。

5.根据权利要求3或4所述的肉兔育种方法，其特征在于，所述物理形态包括兔毛长度。

6.根据权利要求3所述的肉兔育种方法，其特征在于，肉质指标包括如下中的至少一种：pH值、系水力、脂肪坚实度和氧化稳定性。

7.根据权利要求6所述的肉兔育种方法，其特征在于，对兔子进行抽血检测包括采耳血。

8.根据权利要求6或7所述的肉兔育种方法，其特征在于，根据期望的兔子指标，依据CETP基因与兔子肉质指标和/或物理形态之间的关联关系，选择合适的种兔。

9.根据权利要求8所述的肉兔育种方法，其特征在于，所述物理形态包括兔子体重或兔毛长度，所述肉质指标包括pH值、系水力、脂肪坚实度和氧化稳定性中的至少一者。