[发明专利]用于乳腺癌六基因同时检测的引物组与探针组合

说明书

本发明涉及一种用于乳腺癌六基因同时检测的引物组与探针组合，可为临床内分泌药物选择提供客观的检测指标，从而科学、及时地指导患者临床用药。本发明可采用多重RT‑PCR实现检测，特异性强，检测速度快，与基因表达芯片相比费用相对较低。本发明通过检测相关基因的表达水平，量化评估各药物选择的复发风险和治疗获益，协助内分泌治疗药物的选择。本发明设计运用靶向特异性引物组，大幅度提高检测的灵敏度。该检测方法的灵敏度高，特异性好，快速准确，性价比高等优点。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，涉及用于乳腺癌六基因同时检测的引物组与探针组合。

背景技术

乳腺癌已成为全球范围内最常见的恶性肿瘤之一。激素受体阳性乳腺癌是乳腺癌中最常见的类型。内分泌治疗对这类亚型具有显著的治疗效应，但是其耐药性的产生导致患者治疗失败的主要原因。

根据NCCN等治疗指南标准，乳腺癌等激素受体阳性、HER2阴性且无淋巴结转移的乳腺癌患者，首选辅助内分泌治疗。激素受体(ER/PR)可以通过免疫组化(IHC)的方法进行检测，来确定患者是否适合内分泌治疗。

目前临床广泛采用的辅助内分泌治疗药物主要分为以下三类：

(1)选择性雌激素受体调节剂(SERM)，如他莫昔芬(tamoxifen)，托瑞米芬(Toremifene)；

(2)芳香化酶抑制剂(AI)，如依西美坦(Exemestane)、来曲唑(Letrozole)和阿那曲唑(Anastrozole)；

(3)选择性雌激素受体下调剂(SERD)，如氟维司群(Fulvestrant)。此外，mTOR抑制剂，如依维莫司(Everolimus)和CDK4/6抑制剂，包括帕博西尼(Palbociclib)、瑞博细腻(Ribococlib)和玻玛西尼(Abemaciclib)也认为是广义的雌激素受体药物。

如何从现有内分泌治疗药物中选择最适合的一种，目前多依据临床医生的经验，缺乏类似乳腺癌21基因检测类似的客观指标。患者个体化内分泌治疗方案的设计，急需类似客观指标及快速检测方案，来量化评估各药物选择的复发风险和治疗获益。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供用于乳腺癌六基因同时检测的引物组与探针组合，可综合评估患者对内分泌辅助治疗的潜在耐药性，用于辅助肿瘤患者内分泌治疗药物的临床选择。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1、用于乳腺癌六基因同时检测的引物组与探针组合，包含：

(1)引物组：

ESR1正向引物：5’-CGCCGCCTACGAGTTCAA-3’，如SEQ ID NO.1所示；

ESR1反向引物：5’-GGAGACACGCTGTTGAGTGG-3’，如SEQ ID NO.2所示；

ERa36正向引物：5’-AACGCTCTAAGAAGAACA-3’，如SEQ ID NO.5所示；

ERa36反向引物：5’-GTAGGATCATACTCGGAATA-3’，如SEQ ID NO.6所示；

MKI67正向引物：5’-CACCTAAGACCTGAACTA-3’，如SEQ ID NO.7所示；

MKI67反向引物：5’-CCACATGGATTTCTGAAC-3’，如SEQ ID NO.8所示；

KDM5B正向引物：5’-GCATCAAGCAAGAACCTA-3’，如SEQ ID NO.11所示；

KDM5B反向引物：5’-GCCATCACACAACAGTAG-3’，如SEQ ID NO.12所示；