[发明专利]ACE抑制肽P2、其应用及其制备方法

说明书

本发明公开了ACE抑制肽P2其氨基酸序列为：WFRDGQELR，本发明还公开了ACE抑制肽P2在辅助降血压药物或辅助降血压功能食品中的应用，以及ACE抑制肽P2的制备方法。本发明得到的ACE抑制肽P2从河鲀鱼皮中提取得到，与ACE酶的结合能力强、活性高，可以有效地用于降血压药物或功能食品中，以辅助降血压，具有特异性高、毒副作用小的优点。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地，涉及一种ACE抑制肽P2。本发明还涉及了此ACE抑制肽P2的应用及其制备方法。

背景技术

人体的血压调节主要是受到血管紧张素系统(renin-angiotensin system，RAS)和激肽系统(kallikrein kinin system，KKS)控制，而血管紧张素转化酶(Angiotensinconverting enzyme，ACE)在这两个系统中起着关键作用。ACE是一种羧基二肽酶，广泛分布于哺乳动物的组织中，主要以膜结合胞外酶的形式存在于血管上皮细胞。在RAS系统中，ACE能够使没有生理活性的血管紧张素Ⅰ(AngiotensinⅠ，AngⅠ)转化为具有升压活性的血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ，AngⅡ)。在KKS系统中，ACE可将血管舒缓激肽降解为失活片段，导致血管收缩，引起血压升高。目前高血压的药物治疗主要是对ACE进行抑制,相关研究表明一些从动物、植物以及乳制品中分离得到的天然生物活性肽具有抑制ACE活性、降低血压的作用。相比传统降压药物这些天然活性肽具有特异性高、毒副作用小、疗效好、可用药剂量更大等优点。

对酶解制备ACE抑制肽的研究，有以牛奶、乳酪、大豆、蔬菜、小麦等食物性蛋白为原料，经蛋白酶酶解产生能较好抑制ACE活性的抑制肽制备方法。EIJI etal(Angiotensinconverting enzy me inhibitory activity of the short chain peptides derivedfrom various food pro-teins[J].Nippon Shkuhin Kagaku KogakuKaishi,1996,43(7):

839-840.)水解了12种食物蛋白后发现，从鱼、虾和蟹等水产动物蛋白中酶解制得的ACE抑制肽，其降压活性优于其他食物性蛋白。

ACE抑制肽在母体蛋白中没有活性，但能通过酶水解方法从母体蛋白中释放出。由于ACE抑制肽氨基酸组成和结构差别很大，没有固定或统一氨基酸组成，且食物中蛋白酶解产物成分相当复杂，这样就大大增加对其分离提取难度。

ACE抑制肽活性检测方法主要有体内检测和体外实验二种。体外检测一般使用IC₅₀表示ACE抑制剂抑制活性，抑制物IC₅₀越小，其活性越高。

孙美玲等在文章《海参水煮液中ACE抑制肽的分离纯化》(《大连工业大学学报》2019年1月)中采用大孔树吸附的方法对海参水煮液酶解物多肽进行分离，并应用p18反相硅胶柱和LH-20葡聚糖凝胶柱对活性最高的组分进行ACE抑制肽分离纯化,得到2种多肽单体,ACE抑制活性的IC₅₀分别为0.74和1.77mg/mL。

公开号为CN108129561A的专利中公开了一种ACE抑制肽，将大黄鱼肌动蛋白进行虚拟酶切，得到一定量的肽序列，筛选其中未被报道的三肽序列进行毒性、水溶性和ADMET性质的预测，并利用Discoverystudio软件进行分子对接，最终筛选得到三肽His-Glu-Arg(HER)。利用RP-HPLC法进行三肽HER体外ACE抑制活性的鉴定。结果显示HER具有良好ACE抑制活性，IC₅₀值为1.82±0.06mM。