[发明专利]一种纳豆菌发酵菜用大豆等外品产黄酮类物质的方法

说明书

本发明涉及微生物发酵技术领域，具体地涉及一种纳豆菌发酵菜用大豆等外品产黄酮类物质的方法；包括挑选菜用大豆等外品，洗净灭菌蒸熟后使用纳豆菌发酵后熟得纳豆产品，将冻干发酵好的纳豆经石油醚超声除脂后用一定浓度的乙醇溶液热回流提取纳豆中的黄酮类物质，将粗提液过大孔树脂纯化后，旋干收集液后蒸馏水溶解，冷冻干燥得黄酮粉末。本发明可作为降脂产品进行应用，本发明利用从纳豆中提取纯化的黄酮类物质灌胃高脂小鼠，发现黄酮类物质可以降低高脂小鼠血清中血脂浓度，提高血脂代谢清除能力，同时还具有调节免疫的保健功能。本发明具有工艺简单、流程短、成本低的特点，适合大中小不同规模豆制品加工企业。

技术领域

本发明涉及微生物发酵技术领域，具体地涉及一种纳豆菌发酵菜用大豆等外品产黄酮类物质的方法。

背景技术

纳豆营养丰富，具有预防疾病和保健等功能，其中还含有纳豆激酶、异黄酮、超氧化歧化酶、生育酚等多种生理活性物质，可以增强体质、提升机体免疫力，如今纳豆已成为预防和改善心脑血管疾病的首选药食同源食品。目前的研究表明，异黄酮具有对血管的防护作用、类似女性雌激素作用以及抗激素作用、抑菌活性和预防骨质疏松症等；黄酮还可以有效地降血糖和血脂，可以作为辅助降血糖降血脂功能食品的植物提取物来源。

菜用大豆是一种含有丰富的植物蛋白、多种有益的矿物质、维生素及膳食纤维等成分的豆类植物。目前，我国对于菜用大豆的加工多为初步加工，精深加工产品研究和开发还比较落后，技术含量较低，产品附加值低。因此，有必要设计一种纳豆菌发酵菜用大豆等外品产黄酮类物质的方法，以菜用大豆为原料发酵纳豆，从中提取纯化黄酮类物质，以解决菜用大豆等外品剩余和菜豆深加工产品研究、开发落后问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种纳豆菌发酵菜用大豆等外品产黄酮类物质的方法，以菜用大豆为原料发酵纳豆，从中提取纯化黄酮类物质。

本发明解决其技术问题所采取的技术方案是：

一种纳豆菌发酵菜用大豆等外品产黄酮类物质的方法，包括：

(1)原料处理：菜用大豆等外品经挑选、冲洗后称重，121℃高压蒸汽灭菌20min蒸熟；

(2)接种：将纳豆枯草芽孢杆菌菌粉与菜用大豆等外品重量按2％比例配置成菌液，进行接种；

(3)发酵：将倒入菌液的菜用大豆等外品在35～41℃条件下，恒温发酵12～48小时；

(4)后熟：发酵完成后使其在4℃条件下，静置放置6～24小时，得纳豆产品；

(5)提取：冻干打粉后除脂，热回流提取后即得黄酮类物质粗提液；

(6)分离纯化：大孔树脂纯化；

(7)干燥：得冻干粉。

进一步的，所述步骤(1)蒸熟后保持温度在45-55℃。

进一步的，所述步骤(2)的接种量为2％。

进一步的，所述步骤(2)在豆子灭菌蒸熟完成后温度在48-52℃时倒入菌液。

进一步的，所述步骤(3)的发酵温度为37℃，发酵时间为24小时。

进一步的，所述步骤(4)后熟时间为12小时。

进一步的，所述步骤(5)具体过程为：将纳豆产品冻干打粉后称重，加入5倍体积石油醚超声1h，弃去石油醚去除脂肪，除脂完成后加入20倍体积60％乙醇溶液，80℃下热回流提取3h，得黄酮类物质粗提液。

进一步的，所述步骤(6)的大孔树脂纯化为：采用95％乙醇溶液浸泡预处理12h的大孔树脂纯化，优选为D101大孔树脂，上样量250mL，上样流速1.5mL/min，洗脱液为70％乙醇溶液，洗脱流速1.5mL/min。