[发明专利]一种INHB抗体及其应用

说明书

本发明公开了一种INHB抗体，为IgG型，由单克隆细胞株A‑1和B‑2制备获得，细胞株A‑1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期2019年1月16日，保藏编号CGMCC No.17090；细胞株B‑2保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期2019年1月16日，保藏编号CGMCC No.17091。单克隆抗体包括A100和B100，利用抗体A100作为包被抗体，B100作为标记抗体，建立DAS‑ELISA方法，检测天然血清中的INHB含量。本发明的有益效果在于：本单克隆抗体能够特异性的结合INHB，且识别能力和效率较高。本单克隆抗体能够有效应用于药物制备中，增加了药物的靶向性和特异性。

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种INHB抗体及其应用。

背景技术

抑制素是由性腺分泌的一种水溶性蛋白，它由α和β亚基组成，β亚基 分为βA和βB亚基，α和β亚基通过二硫键连接。抑制素有两种形式，即抑 制素A和抑制素B，抑制素A由α亚基和βA亚基组成，抑制素B由α亚基 和βB亚基组成。两个β亚基(βAβA，βAβB，βBβB)构成激活素(activin)， 它的作用与抑制素相反。抑制素主要由卵巢颗粒细胞和睾丸滋养细胞(sertoli’s cell)产生，在精子的发育、卵泡的成熟和胚胎发育过程中起着重 要作用，从而调节生殖和发育过程。抑制素除抑制促卵泡释放激素(FSH) 分泌外，还在多种组织中起旁分泌和自分泌的作用。抑制素α亚基的mRNA 存在于大脑、垂体、脾、肾上腺等组织器官中，且有广泛的生理活性。

抑制素B(inhibin B，INH-B)是睾丸来源的糖蛋白急速，成年男性体 内血清抑制素B水平与FSH呈显著负相关，对FSH起负反馈作用。男性出 生后不久，血清抑制素B水平逐渐上升，抑制素B与FSH之间一直维持负 相关关系。20-30岁时，抑制素B水平达到高峰，伺候抑制素B水平随年龄 增加逐渐降低。

抑制素在生殖系统的重要地位和它活性的广泛性，为抑制素在临床应用 开辟了广阔的前景。由于患有生殖系统肿瘤尤其是颗粒细胞瘤、粘液癌和滋 养细胞瘤的患者血清抑制素水平异常增高。因此，测定血清抑制素水平有可 能作为原发和复发颗粒细胞肿瘤的一种指标，并可用于生殖系统肿瘤的早期 诊断以及肿瘤的原发、复发、转移的诊断。将单克隆抗体联合使用，优选出 特异性较好的单抗组合方式，分别组装检测抑制素及其亚基的ELISA试剂 盒，可用于卵巢粒细胞肿瘤、粘液癌和滋养细胞瘤的诊断。

目前没有任何一项研究使用单一的标志物预测OR(ovarian reserve，卵 巢储备功能)可以获得满意的灵敏度和特异度，提高预测标志物的检测阈 值虽然可以增加特异度，但是灵敏度会随之下降，反之亦然，所以将标志物 联合检测可以提高对OR的预测。有研究表明血清AMH和INHB水平呈 正相关，在临床工作中联合应用检测AMH和INHB水平，可以提高对OR 的预测。OR减退是一个渐进性的过程，早期发现及诊断OR减退，及时进 行干预，可以改善女性的生殖潜能，提高受孕能力及妊娠结局。血清基础 AMH和INHB水平与OR密切相关，二者是目前有价值的预测指标。

目前临床上INHB的检测方法有酶联免疫法(ELISA)、电化学发光法和 化学发光法，这些方法都有各自的优点和不足。ELISA法检测步骤多、耗 时长，操作过程的影响因素较多，易造成假阳性和假阴性结果。因此目前 逐步被化学发光法替代，但这类方法为全封闭系统，价格昂贵，需要专门 培训仪器使用人员，维修及检测成本高，并且不适合单人份和小批量检测 用，目前不利于INHB检测在国内的广泛开展。

中国专利CN201510108832X公开了一种适于利用双标记时间分辨荧光 免疫法快速检测AMH和INHB的试剂盒及其使用方法，通过荧光标记法来 同时检测INHB和AMH，其减少了检测步骤，缩短了加样时间和减少了血 样本的用量，但是检测灵敏度不高，实际检测时间很长，荧光免疫对环境和 操作要求很高，试剂盒检测成功率并不是特别可观。