[发明专利]一种致因纯合突变的矮脚黄鸡品系的培育方法

权利要求书

1.一种致因纯合突变的矮脚黄鸡品系的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、从矮脚黄商品肉鸡中挑选错鉴公鸡，这些公鸡为胫长正常、但含有dw基因的杂合子，将这些公鸡与矮脚黄母鸡进行杂交，得到杂交F1代，在56日龄后将F1代的公鸡进行dw基因突变类型的检测，选择dw基因纯合突变的个体留种使用；

步骤二、将步骤一中dw基因纯合突变的F1代公鸡与黄花母鸡进行杂交，得到母鸡全为dw基因纯合突变的个体；

步骤三、将步骤一中dw基因纯合突变的F1代公鸡与步骤二中dw基因纯合突变的母鸡进行杂交，得到F2代dw基因纯合突变的矮脚黄鸡品系。

2.根据权利要求1所述的一种致因纯合突变的矮脚黄鸡品系的培育方法，其特征在于，步骤一中的错鉴公鸡是从以纯合矮脚黄公鸡为配套父本得到的矮脚黄商品肉鸡中挑选出的。

3.根据权利要求1所述的一种致因纯合突变的矮脚黄鸡品系的培育方法，其特征在于，步骤一中dw基因突变类型检测的方法为：抽提F1代的矮脚黄公鸡的抗凝血，抽提基因组DNA，利用PCR技术进行GHR基因的缺失突变检测或/和点突变检测。

4.根据权利要求3所述的一种致因纯合突变的矮脚黄鸡品系的培育方法，其特征在于，所述缺失突变检测的方法为：

引物序列分别为QS-F1：5＇-GGCAGAAACCCCAAGTATG-3＇；

QS-F2：5＇-TGACGTGAACAGAAGTGCATGAC-3＇；

QS-R：5＇-TCGGGACAGATCAAAGACAAT-3＇；

反应条件为:94℃预变性5min；94℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸30s，35个循环；最后72℃延伸5min。

5.根据权利要求4所述的一种致因纯合突变的矮脚黄鸡品系的培育方法，其特征在于，所述缺失突变检测的标准为：当PCR产物大小为500bp时，则表示没有缺失突变；当产物大小为250bp时，则表示缺失突变纯合子；当产物出现两条条带时，则表示为缺失突变杂合子。

6.根据权利要求3所述的一种致因纯合突变的矮脚黄鸡品系的培育方法，其特征在于，所述点突变检测的方法为：

引物序列分别为DW-F：5＇-ACACATCCTACACCTCGATTTGG-3＇；

DW-R：5＇-CCCAAGGGCATATAGCATTCT-3＇；

应条件为：94℃预变性5min；94℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸30s，35个循环；最后72℃延伸5min；

PCR产物用1％琼脂糖凝胶检测，条带为300bp，产物进行测序，以鉴定点突变情况。

7.根据权利要求6所述的一种致因纯合突变的矮脚黄鸡品系的培育方法，其特征在于，所述点突变检测的标准为：测序结果与参考序列进行比对，当335位点为TT基因型时则为野生型纯合子，表现为正常型胫长；当335位点为CC基因型时则为突变型纯合子，表现为矮脚；当335位点为CT基因型时则为杂合子，表现为正常型胫长。

8.根据权利要求1所述的一种致因纯合突变的矮脚黄鸡品系的培育方法，其特征在于，步骤一中的矮脚黄商品肉鸡来自于广东温氏食品集团有限公司。

9.根据权利要求1所述的一种致因纯合突变的矮脚黄鸡品系的培育方法，其特征在于，步骤一中的矮脚黄母鸡来自于广东温氏食品集团有限公司。

10.根据权利要求1所述的一种致因纯合突变的矮脚黄鸡品系的培育方法，其特征在于，步骤二中的黄花母鸡来自于广东温氏食品集团有限公司。