[发明专利]替莫唑胺原料药中甲胺含量的测定方法

说明书

本发明公开了一种替莫唑胺原料药中甲胺含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：配制对照品溶液：精密称定甲胺盐酸盐，加乙腈、衍生化试剂、硼酸盐缓冲溶液稀释制备对照品溶液；配制供试品溶液：精密称定替莫唑胺原料药，加乙腈、衍生化试剂、硼酸盐缓冲溶液稀释制备供试品溶液；配制空白溶液：精密量取乙腈、衍生化试剂、硼酸缓冲溶液、氨水1ml，用乙腈稀释配制空白溶液；采用高效液相色谱法分析，精密量取空白溶液、供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算供试品中甲胺盐酸盐的含量，所述甲胺盐酸盐的含量乘以换算系数0.46，即得替莫唑胺原料药中甲胺的含量。

技术领域

本发明属于药物技术领域，涉及药物杂质检测分析领域，具体涉及一种替莫唑胺原料药中甲胺含量的测定方法。

背景技术

替莫唑胺(Temozolomide)为一种烷化剂型抗癌药物，由英国Can researchventures公司首创，Schering-Plough公司开发，1999年8月经FDA批准在美国获准上市，同时在欧洲多国上市。具有广谱抗肿瘤活性[L.H.Tsang，et al.Cancer ChemotherPharmacol.27(1991)：342-346]，尤其是对神经胶质瘤(脑癌)和黑色素瘤(皮肤癌)。替莫唑胺的胶囊剂已在欧美批准用于治疗恶性神经胶质瘤。

药品的安全有效是当前人们普遍关注的重要问题，现有的替莫唑胺合成工艺以5-氨基-咪唑-4-甲酰胺或其盐酸盐为原料,经重氮化合成5-重氮基-咪唑-4-甲酰胺,然后在极性溶剂DMSO存在下与异氰酸甲酯反应合成替莫唑胺。原料5-氨基-咪唑-4-甲酰胺的合成工艺如下：

在原料5-氨基-咪唑-4-甲酰胺的合成过程中使用了甲酰胺，甲酰胺的合成工艺如下：

因此，替莫唑胺原料药中有存在甲胺的可能，甲胺属有毒物质。按照ICH M7指导原则规定，替莫唑胺属抗癌药，因此根据其服药周期1-10年，得出MIC的每日最大摄入限量可按照10μg计算，替莫唑胺日最大服用剂量按照400mg计算，则限度相当于25ppm(0.0025％)，因此，替莫唑胺中甲胺限度要求不超过25ppm(0.0025％)。然而，我国在替莫唑胺的法定标准中，尚未收载替莫唑胺中有甲胺的检查方法，标准缺失，国内外均无相关文献报道，无法评价药品质量，存在安全隐患。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种检测替莫唑胺原料药中甲胺的方法，该方法具有过程简单、使用成本低廉、精密度好、准确度高等特点，能快速地测定替莫唑胺原料药中甲胺的含量。

本发明是通过以下技术方案实现的：

替莫唑胺原料药中甲胺含量的测定方法，包括以下步骤：

配制对照品溶液：精密称定甲胺盐酸盐，加乙腈、衍生化试剂、硼酸盐缓冲溶液稀释制备对照品溶液；

配制供试品溶液：精密称定替莫唑胺原料药，加乙腈、衍生化试剂、硼酸盐缓冲溶液稀释制备供试品溶液；

配制空白溶液：精密量取乙腈、衍生化试剂、硼酸缓冲溶液、氨水1ml，用乙腈稀释配制空白溶液；

采用高效液相色谱法分析，精密量取空白溶液、供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；对比空白溶液色谱图和对照品溶液色谱图，确定甲胺衍生物峰，供试品溶液的色谱图中如有与对照品溶液色谱图中甲胺衍生物峰保留时间一致的峰，按外标法以峰面积计算供试品中甲胺盐酸盐的含量，所述甲胺盐酸盐的含量乘以换算系数0.46，即得替莫唑胺原料药中甲胺的含量。

本发明的进一步改进方案为：