[发明专利]淋球菌、沙眼衣原体和解脲支原体的三联检引物组、产品及应用

说明书

本发明提供了一种淋球菌、沙眼衣原体和解脲支原体的三联检引物组、产品及应用，涉及分子生物技术领域，本发明提供的引物组包括用于检测淋球菌的引物对、用于检测沙眼衣原体的引物对和用于检测解脲支原体的引物对，实现了一个检测体系能够同时检测淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)三种病原体，并且本发明提供的引物组还具有灵敏度高、特异性好、可重复性强，检测结果快速直观等优点。

技术领域

本发明涉及分子生物技术领域，尤其是涉及一种淋球菌、沙眼衣原体和解脲支原体的三联检引物组、产品及应用。

背景技术

淋球菌是一种革兰阴性的专性需氧双球菌，是引起淋病的主要病原体，特点为潜伏期短、传染性强，如不及时治愈可出现严重的并发症和后遗症。根据临床表现分为有症状的泌尿生殖系统感染(常见表现为化脓性炎症)，无症状的泌尿生殖系统感染，眼、咽、皮肤、直肠、盆腔等部位的感染，以及血行播散式感染。男性常见的表现是尿道炎，并发症有附睾炎、前列腺炎、精囊炎等，女性常见的表现是宫颈炎、尿道炎、前庭大腺炎、肛周炎，并发症有盆腔炎；可诱发生育能力下降，新生儿结膜炎等。淋病的早期诊断对于其及时治疗、防止慢性感染有重要价值。

生殖道衣原体是常见的性传播疾病，是革兰阴性病原体，没有合成高能化合物ATP的能力，必须由宿主细胞提供，因而是能量寄生物。衣原体是一类能通过细胞滤器，有独特发育周期、严格细胞内寄生的原核细胞型微生物，比病毒大，比细菌小，呈球形。沙眼衣原体引起的疾病范围非常广泛，可累及眼、生殖道、直肠等多个脏器，也可发生母婴传播。根据临床表现分为具有泌尿生殖道症状体征的患者，无症状感染者和新生儿感染。男性常见的临床表现是尿道炎、附睾炎，女性则为宫颈炎、尿道炎、盆腔炎，可诱发生育能力下降，新生儿结膜炎等。

解脲支原体为脲原体属中的一种，目前可分为14个血清型，是人类泌尿生殖道常见的共生微生物，为致病性较弱的条件致病病原体。成人主要通过性接触传播，新生儿则由母亲生殖道分娩时感染。成人男性的感染部位在尿道粘膜，女性的感染部位在宫颈。妇女妊娠后，由于孕激素的增加，抑制了细胞免疫，机体抵抗力下降，更易受到解脲支原体感染。主要引起非淋菌性尿道炎(子宫炎)、子宫内膜炎、绒毛膜羊膜炎、自然流产、早产、前列腺炎、不育症以及败血症等。解脲支原体感染造成的女性生殖器官病理性改变，是不孕不育的重要原因。解脲支原体感染孕妇容易造成其流产，因此对于不明原因的流产，尤其是多次流产者，应考虑是否有解脲支原体感染的可能。解脲支原体可经过胎盘垂直传播或由孕妇下生殖道感染上行扩散，引起宫内感染，两者均可导致流产、早产、胎儿宫内发育迟缓、胎膜早破，甚至造成胎死宫内等一系列不良后果。

目前，淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)的检测方法主要有细菌的分离培养方法，免疫学诊断和分子生物学诊断。病原体的分离培养是淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)检测的金标准，但是分离培养法对技术要求较高，费用昂贵且耗时长，目前多用于实验研究。免疫学方法简便快捷，但特异性差、灵敏度不高。近年来，实时定量PCR检测平台已渐渐显示了其在检测上的优势，可直接从临床样本(如尿道拭子、宫颈拭子或尿液)中提取病原体的核酸进行检测，该方法具有快速、准确和灵敏度高等优点。

目前国内的核酸诊断中应用最为广泛的是以荧光标记探针为基础的实时荧光PCR技术。检测探针5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团，当探针完整时，由于淬灭基团靠近荧光报告基团而极大降低了报告基团发出的荧光。在PCR延伸反应过程中，Taq酶的外切酶活性将5’端荧光集团从探针上切割下来，使之游离于反应体系中，从而脱离了3’端荧光淬灭集团的屏蔽，从而发出可供仪器检测的荧光。国内临床上检测淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)DNA的方法主要基于实时荧光定量PCR技术及其改进。大部分产品采取针对淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)或解脲支原体(UU)单一检测方法，这样增加了检测成本及其操作的繁琐度。

因此，开发简单、方便、快捷且成本较低的淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)三联检试剂盒及检测方法尤为重要。