[发明专利]一种基于风险评估模型的女性生育遗传风险基因检测方法

说明书

本发明提供了一种基于风险评估模型的女性生育遗传风险基因检测方法，包括：确定基因检测的目标基因和位点；制备特异性多重PCR引物或基因芯片；提取DNA数据，通过多重PCR扩增和基因芯片检测的结合或者多重PCR扩增和高通量测序法的结合对DNA数据进行检测；对DNA数据进行生物信息分析，获取目标位点的基因型；采用复合随机森林算法构建风险评估模型并进行计算，获得不同基因型、表型和疾病的风险评分，从而获得检测和评估报告，对患者进行遗传咨询和健康指导。排除了假基因等非特异性扩增，检测结果的特异性高；所有基因和位点都经过严格验证，权威，降低了检测和评估成本，方便受检者就检，节约医疗资源，降低社会成本。

技术领域

本发明涉及基因检测技术领域，具体地说涉及一种评估女性生育遗传风险和指导健康管理的基因检测方法。

背景技术

生育评估也称医学生育力评估，主要是对有意生育的育龄夫妇的病史、职业、饮食、居住环境、女性的排卵情况、输卵管功能及卵巢功能和男性精液情况等进行系统多项的评估。

目前医院的女性生育力评估主要包括卵巢功能评估、子宫输卵管检查、子宫形态检查、免疫检查和性激素指标等。目前针对女性生育的评估很少有全面的遗传基因方面的检测。

有研究表明，肥胖、卵巢功能、甲状腺功能、糖尿病和叶酸吸收能力等均会影响女性的生育力。肥胖的人往往激素分泌低于正常水平或激素受体不敏感，因此导致女性的性欲下降。值得注意的是，如果是中度或者是重度的肥胖患者，对性功能也会有影响。这是由于肥胖所产生的过多的脂肪蓄积在体内，使得身体内所分泌的性激素被脂肪所阻断无法让其发挥正常的功能，进而导致肥胖的人性欲下降，比正常人拉低许多。肥胖还会造成女性的内分泌紊乱，女性的正常排卵是需要性激素来刺激合成才能正常的运转。而性激素由于脂肪阻断一方面致使内分泌紊乱，另一方面改变了分泌以及合成的正常规律，从而影响了排卵周期导致生育受到影响。肥胖的妇女往往还容易患多囊卵巢综合征，该综合征以雄激素水平较高为特征，导致妇女月经渐少甚至导致闭经，并且面部青春痘过多，伴有身体的体毛过多等症状，体内的雄性激素过多而导致卵泡发育不成熟，进而影响了正常卵的排放。卵巢功能早衰(POF)是指卵巢功能衰竭所导致的40岁之前即闭经的现象。特点是原发或继发闭经伴随血促性腺激素水平升高和雌激素水平降低，并伴有不同程度的一系列低雌激素症状如：潮热多汗、面部潮红、性欲低下等。妇女的平均自然绝经年龄为50～52岁，绝经年龄存在着种族和地区分布的差异，但其绝对值相差不大。Coulam等总结1858例妇女的自然闭经情况，小于40岁的POF发生率为1％，小于30岁的POF发生率为1‰。原发闭经中POF占10％～28％，继发闭经中POF占4％～18％。徐苓等发现北京地区妇女POF发生率为1.8％。由此可见，POF在临床上并不少见。POF患者至少有6个月的闭经史和卵泡刺激素血浆水平升高(超过40mIU/ml)；该疾病可能是由于滤泡池过早枯竭，滤泡闭锁，卵泡生长停滞或卵巢发育不全。甲状腺是人体重要的内分泌器官,其功能亢进或减退均会影响女性生育能力。甲状腺功能异常可影响女性血清促性腺激素和性激素水平。甲状腺激素可直接作用于卵巢,其过多或过少均可影响卵泡发育,损害卵巢储备力。甲状腺激素对输卵管功能的影响尚不明确。已有证据显示甲状腺激素可直接参与调节子宫内膜生理功能,影响子宫内膜容受性。甲状腺疾病可能影响宫腔对妊娠的承受能力,增加产科并发症和不良妊娠结局的发生。糖尿病患者由于体内胰岛素水平异常和/或血糖控制不佳，可导致下丘脑-垂体-卵巢轴激素分泌失调、卵泡募集及卵子发育异常，从而使其生殖系统功能受损。胰岛素缺乏型的糖尿病患者，胰岛素水平低下可导致下丘脑亲吻素(kisspeptin)蛋白表达下降。由于kisspeptin具有刺激促性腺激素释放激素(GnRH)分泌的作用，因此胰岛素缺乏可致使GnRH分泌减少，进一步导致促卵泡生成素/促黄体生成素(FSH/LH)分泌均不足，造成低促性腺激素型性腺功能减退。补充外源性胰岛素可纠正这一激素水平异常。糖尿病患者需皮下注射胰岛素者，由于外源性胰岛素直接进入体循环未经过肝的清除效应，外周组织的胰岛素水平要比生理状态下高。另外有部分2型糖尿病或糖耐量异常患者因胰岛素抵抗导致内源性胰岛素水平过高。以上两种原因造成的体内外源性胰岛素水平过高，首先可促进卵泡膜细胞分泌睾酮和雄烯二酮导致高雄激素血症；其次胰岛素和FSH的共同作用可刺激颗粒细胞分泌雌激素，促进卵泡募集和生长，出现多囊卵巢的表现。与非糖尿病的多囊卵巢综合症不同，胰岛素可协同促性腺素的作用而促进卵泡成熟。糖尿病会导致卵巢储备下降及卵子凋亡，糖尿病控制不佳导致血糖升高，一方面高血糖导致晚期糖基化终末产物及其受体增加，上述物质可影响卵子发育，造成卵子凋亡及卵巢储备功能下降。另一方面，糖毒性加重胰岛素抵抗，使内源性胰岛素分泌过多或外源性胰岛素用量增加，从而使卵巢暴露于高胰岛素的环境中。