[发明专利]PCR仪的光路校准方法、装置及PCR仪有效
申请号: | 202010319634.9 | 申请日: | 2020-04-21 |
公开(公告)号: | CN111707646B | 公开(公告)日: | 2020-12-25 |
发明(设计)人: | 曹进涛;李冬;贺贤汉 | 申请(专利权)人: | 杭州博日科技股份有限公司 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N21/01;C12M1/34 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 王学强 |
地址: | 310000 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | pcr 校准 方法 装置 | ||
本发明提供了一种PCR仪的光路校准方法、装置及PCR仪,PCR仪包括具有M排N列孔位的样品板,孔位用于放置试管,每个孔位对应一个光路,其中,M≥2,N≥2,且M、N为整数;根据获取的本底信号值和测量的第一染料信号值计算M×N个孔位对应的第二染料信号值;根据第二染料信号值计算M×N个孔位对应的第一校准系数;获取第一多连管中每一个试管对应的第二校准系数;根据第一校准系数和第二校准系数计算得到M×N个孔位对应的目标校准系数。通过上述目标校准系数可以对PCR仪的多个孔位进行校准,以减小不同孔位对应的光路间的差异,使不同孔位对同一个信号检测时的信号强度保持一致,提高检测结果的精准性。
技术领域
本发明涉及生物检测技术领域,尤其是涉及一种PCR仪的光路校准方法、装置及PCR仪。
背景技术
实时荧光定量聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术能实现对DNA模板的定量分析,对分子生物学研究和医学研究等具有重要意义。实时聚合酶链式反应技术依赖于精确检测初始基线以上的荧光发射信号,此时,PCR检测仪样品板的多个孔位在检测同一个荧光信号时的信号强度应该一致。然而由于不同孔位之间本身存在差异,或者不同孔位对应的光纤、透镜、光源间存在差异,或者对应的检测器中存在噪声,都会造成不同孔位对应的光路出现差异,导致不同孔位针对同一个信号测量的值不一样,出现信号的失真,导致检测结果的精准性降低。
发明内容
本发明的目的在于提供一种PCR仪的光路校准方法、装置及PCR仪,以缓解由于信号失真,导致检测结果的精准性降低的技术问题。
本发明实施例提供了一种PCR仪的光路校准方法,所述PCR仪包括具有M排N列孔位的样品板,所述孔位用于放置试管,每个所述孔位对应一个光路,其中,M、N为整数,且M≥2,N≥2,所述方法包括:
采用不掺杂染料的第一多连管测量M×N个所述孔位对应的本底信号值;其中,所述第一多连管为M连管或者N连管;
采用掺杂染料的所述第一多连管测量M×N个所述孔位对应的第一染料信号值;
根据所述本底信号值和所述第一染料信号值计算M×N个所述孔位对应的第二染料信号值;其中,每个所述孔位对应的第二染料信号值为其对应的第一染料信号值与其对应的本底信号值的差值;
根据所述第二染料信号值计算M×N个所述孔位对应的第一校准系数;
获取所述第一多连管中每一个试管对应的第二校准系数;
根据所述第一校准系数和所述第二校准系数计算得到M×N个所述孔位对应的目标校准系数。
进一步的,所述不掺杂染料的第一多连管包括空的第一多连管或者承装不掺杂染料的本底液的第一多连管。
进一步的,所述采用不掺杂染料的第一多连管测量M×N个所述孔位对应的本底信号值的步骤,包括:
采用多条所述第一多连管通过一次测量得到M×N个所述孔位对应的所述本底信号值;
或者,
采用一条所述第一多连管通过多次测量得到M×N个所述孔位对应的所述本底信号值。
进一步的,所述采用掺杂染料的第一多连管测量M×N个所述孔位对应的第一染料信号值的步骤,包括:
将掺杂染料的M连管分N次分别放置在所述样品板的N列上进行N次测量,得到M×N个所述孔位对应的所述第一染料信号值;
或者,
将掺杂染料的N连管分M次分别放置在所述样品板的M排上进行M次测量,得到M×N个所述孔位对应的所述第一染料信号值。
进一步的,所述根据所述第二染料信号值计算M×N个所述孔位对应的第一校准系数的步骤,包括:
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