[发明专利]一种基于RT-LAMP技术检测新冠病毒用引物组及检测试剂盒

说明书

本发明提供了一种基于RT‑LAMP技术检测新冠病毒用引物组及检测试剂盒，属于病毒检测技术领域。所述引物组包括两组引物组，检测新冠病毒的Orf1ab基因的RT‑LAMP引物组包括2条外引物F3/B3、2条内引物FIP/BIP和2条环引物Loop‑F/Loop‑B，检测新冠病毒的N基因的RT‑LAMP引物组包括2条外引物F3/B3、2条内引物FIP/BIP和1条环引物Loop‑F。该检测试剂盒包括所述引物组。所述试剂盒基于RT‑LAMP技术检测新冠病毒，具有特异性强、准确性好和灵敏度高的特点，与荧光RT‑PCR检测方法相比，大大缩短检测时间，实现快速高效检测新冠病毒的目的。

技术领域

本发明属于病毒检测技术领域，具体涉及一种基于RT-LAMP技术检测 新冠病毒用引物组及检测试剂盒。

背景技术

新冠病毒，又称为新型冠状病毒，国际病毒分类委员会已将其命 名为“SARS-CoV-2”。新型冠状病毒肺炎临床表现以发热、乏力、干 咳为主要表现，鼻塞、流涕等上呼吸道症状少见。约半数患者多在一 周后出现呼吸困难，严重者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒征 休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍。

按照最新指南规定，利用荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸阳性仍然 是确诊的金标准。但需要较昂贵的仪器和专业的技术人员，检测时间长，试 验成本也偏高。

环介导等温扩增(LAMP)检测技术的特点是针对靶基因的6个区域设计 4种特异引物，在DNA聚合酶(BstDNA polymerase)的作用下，恒温条件下 进行核酸扩增，具有操作简单、特异性强特点。另外通过环引物的添加，大 大加快了反应的速度。LAMP检测技术最大的优势在于不依赖于昂贵的专业 检测设备，该方法简便易操作，实验流程简单快速，不具备专业技能的一般 人员就能在疾病现场进行快速诊断。LAMP反应成功与否的关键步骤是LAMP反应的引物设计。然而由于新冠病毒缺乏特异性扩增引物，导致 LAMP检测技术难以在新冠病毒检测中应用。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种基于RT-LAMP技术检测新冠病 毒用引物组及检测试剂盒，具有检测快速准确，检测灵敏度高的特点。

本发明提供了一种基于RT-LAMP技术检测新冠病毒用引物组，包括检 测新冠病毒SARS-CoV-2的Orf1ab基因的RT-LAMP引物组和检测新冠病毒 SARS-CoV-2的N基因的RT-LAMP引物组；

所述检测新冠病毒SARS-CoV-2的Orf1ab基因的RT-LAMP引物组包括2条外引物Orf1ab-F3/Orf1ab-B3、2条内引物Orf1ab-FIP/Orf1ab-BIP和2条 环引物Orf1ab-Loop-F/Orf1ab-Loop-B，其中Orf1ab-F3的核苷酸序列为SEQ ID No.1，Orf1ab-B3的核苷酸序列为SEQ ID No.2，Orf1ab-FIP的核苷酸序 列为SEQ ID No.3，Orf1ab-BIP的核苷酸序列为SEQID No.4，Orf1ab-Loop-F 的核苷酸序列为SEQ ID No.5，Orf1ab-Loop-B的核苷酸序列为SEQ ID No.6；

所述检测新冠病毒SARS-CoV-2的N基因的RT-LAMP引物组包括2条 外引物N-F3/N-B3、2条内引物N-FIP/N-BIP和1条环引物N-Loop-F；所述 N-F3的核苷酸序列为SEQ IDNo.7，N-B3的核苷酸序列为SEQ ID No.8， N-FIP的核苷酸序列为SEQ ID No.9，N-BIP的核苷酸序列为SEQ ID No.10， N-Loop-F的核苷酸序列为SEQ ID No.11。

本发明提供了一种基于RT-LAMP技术新冠病毒检测试剂盒，包括所述 的引物组。