[发明专利]一种嵌合蛋白及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种嵌合蛋白，其特征在于，由两端带有半胱氨酸的36个SRT-ELP蛋白单元组成；

所述ELP蛋白序列如SEQ ID NO:1所示，所述SRT蛋白序列如SEQ ID NO:2所示。

2.权利要求1所述嵌合蛋白在制备生物蛋白纤维中的应用。

3.权利要求1所述嵌合蛋白的制备方法，其特征在于，包括：

步骤1、构建SRT-ELP蛋白单元的编码序列，以及酶切位点1、同源臂1、酶切位点2、同源臂2、酶切位点3、终止密码子对应的DNA编码序列和酶切位点4；

步骤2、依次连接酶切位点1、同源臂1、酶切位点2、ELP-SRT蛋白单元/SRT–ELP蛋白单元编码序列、同源臂2、酶切位点3、终止密码子对应的DNA编码序列和酶切位点4，组成酶切位点1+同源臂1+酶切位点2+ELP-SRT蛋白单元/SRT-ELP蛋白单元编码序列+同源臂2+酶切位点3+终止密码子对应的DNA编码序列+酶切位点4的基因元件1；

其中，所述酶切位点1和酶切位点4依据所选择的表达载体确定，酶切位点3选择与酶切位点1和酶切位点4不同的酶切位点；所述同源臂1任意设计，所述酶切位点2与其余酶切位点不同且选择3’末端为起始密码子对应的DNA编码序列的酶切位点；所述同源臂2选自ELP-SRT蛋白单元/SRT-ELP蛋白单元编码序列5’端的部分序列；

步骤3、将步骤2所述基因元件1通过酶切位点1和酶切位点4的双酶切转移至表达载体中，获得嵌合蛋白单体表达载体，转化宿主诱导蛋白表达可获得具有一个SRT-ELP蛋白单元的嵌合蛋白；

步骤4、将所述嵌合蛋白单体表达载体通过酶切位点1和酶切位点3的双酶切获得同源臂1+酶切位点2+ELP-SRT蛋白单元/SRT-ELP蛋白单元编码序列+同源臂2的基因元件2，在重组酶的作用下与经过酶切位点2单酶切的嵌合蛋白单体表达载体进行同源重组，获得嵌合蛋白二聚体表达载体；按照本步骤的方法不断同源重组基因元件2可获得嵌合蛋白多聚体表达载体；转化宿主诱导蛋白表达可获得具有36个SRT-ELP蛋白单元的嵌合蛋白；

在所述SRT-ELP蛋白单元编码序列的两端添加半胱氨酸的编码序列。

4.一种生物蛋白纤维，其特征在于，由权利要求1所述嵌合蛋白经戊二醛交联后获得。

5.权利要求4所述生物蛋白纤维的制备方法，其特征在于，权利要求1所述嵌合蛋白与戊二醛溶液交联，获得所述生物蛋白纤维。

6.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于，权利要求1所述嵌合蛋白与低浓度的戊二醛溶液进行预交联，然后再与高浓度的戊二醛溶液中交联制备纤维，获得所述生物蛋白纤维。

7.根据权利要求5或6所述制备方法，其特征在于，还包括将所述生物蛋白纤维进行后拉伸。