[发明专利]靶向HLA-B的嵌合抗原受体、编码基因、CAR-Tregs细胞及其制备方法、用途

权利要求书

1.一种靶向HLA-B的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括信号肽、抗原结合结构域、铰链区、跨膜区、共刺激因子和胞内信号传导域；所述抗原结合域为抗HLA-B13抗体、抗HLA-B15抗体、抗HLA-B46抗体和抗HLA-B58抗体的结合结构域中的任意一种；

所述抗HLA-B13抗体为靶向HLA-B13的单链抗体，其包括串联的HLA-B13单链抗体重链VH、HLA-B13单链抗体轻链VL；HLA-B13单链抗体重链VH位于所述靶向HLA-B13的单链抗体的N端，HLA-B13单链抗体轻链VL位于靶向所述HLA-B13的单链抗体的C端；HLA-B13单链抗体重链VH氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示， HLA-B13单链抗体轻链VL氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；

所述抗HLA-B15抗体为靶向HLA-B15的单链抗体，其包括串联的HLA-B15单链抗体重链VH、HLA-B15单链抗体轻链VL；HLA-B15单链抗体重链VH位于所述靶向HLA-B15的单链抗体的N端，HLA-B15单链抗体轻链VL位于靶向所述HLA-B15的单链抗体的C端；HLA-B15单链抗体重链VH氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示， HLA-B15单链抗体轻链VL氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；

所述抗HLA-B46抗体为靶向HLA-B46的单链抗体，其包括串联的HLA-B46单链抗体重链VH、HLA-B46单链抗体轻链VL；HLA-B46单链抗体重链VH位于所述靶向HLA-B46的单链抗体的N端，HLA-B46单链抗体轻链VL位于靶向所述HLA-B46的单链抗体的C端；HLA-B46单链抗体重链VH氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示， HLA-B46单链抗体轻链VL氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示；

所述抗HLA-B58抗体为靶向HLA-B58的单链抗体，其包括串联的HLA-B58单链抗体重链VH、HLA-B58单链抗体轻链VL；HLA-B58单链抗体重链VH位于所述靶向HLA-B58的单链抗体的N端，HLA-B58单链抗体轻链VL位于靶向所述HLA-B58的单链抗体的C端；HLA-B58单链抗体重链VH氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示， HLA-B58单链抗体轻链VL氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示；

HLA-B13单链抗体重链VH和HLA-B13单链抗体轻链VL，HLA-B15单链抗体重链VH和HLA-B15单链抗体轻链VL，HLA-B46单链抗体重链VH和HLA-B46单链抗体轻链VL，HLA-B58单链抗体重链VH和HLA-B58单链抗体轻链VL均通过连接肽连接。

2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述信号肽选自CD8信号肽、CD28信号肽和CD4信号肽中的任意一种；所述铰链区选自CD8α铰链区、IgD铰链区、IgG1 FcCH2CH3铰链区和IgG4 Fc CH2CH3铰链区中的任意一种；所述跨膜区选自CD28跨膜区、CD8跨膜区、CD3ζ跨膜区、CD134跨膜区、CD137跨膜区、ICOS跨膜区和DAP10跨膜区中的任意一种；共刺激因子选自CD27、CD28、4-1BB、OX40、CD30、CD40和ICOS中的一种或多种；所述胞内信号域为CD28胞内结构域或CD3ζ胞内结构域。

3.一种编码基因，其编码权利要求1或2所述的嵌合抗原受体。

4.根据权利要求3所述的编码基因，其特征在于，所述编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO.17、SEQIDNO.18、SEQIDNO.19、SEQIDNO.20中任意一项所示。

5.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包括如权利要求3所述的编码基因。

6.一种CAR-Tregs细胞，其特征在于，所述的CAR-Tregs细胞是所述权利要求1或2所述的嵌合抗原受体修饰的Treg细胞。

7.一种权利要求6所述CAR-Tregs细胞的制备方法，其特征在于，包括：所述的嵌合抗原受体通过其编码的核酸序列转染到Treg细胞中表达。