[发明专利]一种蔗糖水解酶突变体及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 202010299239.9 | 申请日： | 2018-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN111518791B | 公开（公告）日： | 2021-11-23 |
| 发明（设计）人： | 吴敬;宿玲恰;郭志勇;李玲玲;姚锴琳 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 蔗糖 水解 突变体 及其 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种蔗糖水解酶突变体，其特征在于，所述蔗糖水解酶突变体与氨基酸序列如SEQID NO.2所示的蔗糖水解酶相比，第279位丝氨酸残基突变为了丙氨酸残基。
2.编码权利要求1所述蔗糖水解酶突变体的基因。
3.携带权利要求2所述基因的载体。
4.携带权利要求2所述基因的重组细胞。
5.制备权利要求1所述蔗糖水解酶突变体的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)在蔗糖水解酶氨基酸序列上确定突变位点；设计定点突变的突变引物，以携带蔗糖水解酶基因的载体为模板进行定点突变；构建含突变体的质粒载体；
(2)将突变体质粒转化进宿主细胞；
(3)挑选阳性克隆进行发酵培养，并纯化蔗糖水解酶突变体。
6.根据权利要5所述的方法，其特征在于，所述质粒载体为pUC系列，pET系列，或pGEX中的任意一种。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述宿主细胞为细菌或真菌细胞；所述的细菌为革兰氏阴性菌或革兰氏阳性菌。
8.权利要求1所述的蔗糖水解酶突变体在生产多聚糖中的应用。
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