[发明专利]一株凝结芽孢杆菌及其在茶叶种植上的应用

说明书

本发明属于微生物技术领域，具体公开了一株凝结芽孢杆菌及其在茶叶种植上的应用，本发明公开的凝结芽孢杆菌保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2020066。该菌株生长速度快，具有较强的吲哚乙酸产生能力，能快速发酵土豆淀粉废水转化为微生物叶面肥产品，同时具备茶树定殖能力，该叶面肥产品应用与茶树喷施，能能提高茶叶百芽鲜重、绿茶提取物和茶多酚含量。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种凝结芽孢杆菌及其在茶叶种植中的应用。

背景技术

叶面施肥是将作物所需养分以溶液喷雾方式直接喷施于作物叶片表面，作物通过叶面以渗透扩散方式吸收养分并输送到作物体内各部分，以满足作物体生长发育所需。它是作物获取养分的辅助方式。在农业生产实践中，常常有作物表现出对养分需求的迫切性，但通过土壤施肥却往往达不到预期效果或不能及时满足作物所需，而通过叶面施肥则往往能取得良好的效果，可表现出比土壤施肥更大的优越性。

茶树叶片能有选择地吸收吸附在叶表,并能进入叶片细胞的营养物质。叶片吸收的营养物质,主要通过叶片表面角质层化合物分子间隙向内渗透进人叶片细胞。这些物质进入细胞后,同根部吸收的营养物质一样被同化。近几年来,茶叶叶面施肥已日渐普及,随着叶面肥的广泛使用,商品叶面肥品种也日渐丰富。根据叶面肥的作用和功能,可将其分为营养型、调节型、生物型、复合型叶面肥四大类。其中，生物型叶面肥通常通过功能微生物发酵生产，产品富含微生物体及代谢物，如氨基酸、核苷酸、核酸类物质。主要功能是刺激作物生长，促进作物代谢，减轻和防止病虫害的发生等。据报道，生产菌株有圆褐固氮菌、胶冻样类芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌等。另有中国科学院建成(大连)农业技术有限公司开发的“中科绿宝一号”生物叶面肥，北京美澳生物科技有限公司生产“芽满楼”生物叶面肥，均未标明生产菌株和生产工艺。

综合目前的研究成果，大多数生物叶面肥采用传统微生物肥料菌株生产，并非茶叶种植专用，在实际应用中存在用量大、效果不理想等问题。寻求茶叶种植叶面肥专用高效的微生物菌株已然成为目前亟待解决的问题之一。

凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)，分类学上属于芽孢杆菌属，细胞呈杆状，革兰氏阳性菌，端生芽孢，无鞭毛。分解糖类生成L-乳酸，为同型乳酸发酵菌。最适生长温度为45-50℃，最适pH为6.6-7.0。具公开文献，凝结芽孢杆菌能产乳酸，作为益生菌株可以用于人类腹泻药物和动物微生物饲料添加剂，目前还未见将其用于茶叶种植上的报道。

发明内容

本发明的目的是提供一株可用于茶叶种植的凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)，保藏编号为CCTCC NO：M2020066。

本发明的另一个目的在于提供了凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)B06在制备叶面肥中的应用，利用该菌株发酵生产的叶面肥能能提高茶叶鲜重、绿茶提取物和茶多酚含量。

为了达到上述目的，本发明采取以下技术措施：

一株凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)，通过以下方法筛选得到：

1)从华中农业大学茶园采集多份茶树根部土壤，从土壤中挑选到一株IAA高产菌株，通过生理生化及16S rRNA基因序列鉴定为凝结芽孢杆菌。以此为出发菌株再经过常压室温等离子体诱变筛选获得一株IAA高产的凝结芽孢杆菌B06。

2)该菌株于2020年4月9日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，分类命名：凝结芽孢杆菌Bacillus coagulans B06，保藏号为CCTCC NO：M2020066，地址：中国武汉武汉大学。

菌株B06具有典型的凝结芽孢杆菌特征：该菌株在MRS培养基上生长良好，48h形成直径2-3mm大小的圆形菌落，白色而有光泽，表面湿润、平坦，边缘整齐。革兰氏染色，油镜观察，菌株B06菌体形态为杆状，革兰氏阳性，单个、成对或链状排列，芽孢端生。