[发明专利]一种烟草eIFiso4E-T突变体及在培育抗病毒病烟草中的应用

说明书

一种烟草eIFiso4E‑T突变体及在培育抗病毒病烟草中的应用。所述烟草eIFiso4E‑T突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2或者SEQ ID NO:3所示，与SEQ ID NO:1所示的野生型烟草eIFiso4E‑T的氨基酸序列相比，所述烟草eIFiso4E‑T突变体的氨基酸序列第76位由A突变为T或者第98位由G突变为D。将eIFiso4E‑T突变体与抗马铃薯Y病毒的va位点或eifiso4e‑t^KO基因聚合，可获得烟草对PVY的持久抗性。本发明所述的eIFiso4E‑T突变体对于培育持久抗PVY烟草具有重要意义。

技术领域

本发明属于生物技术领域，进一步属于烟草生物技术育种领域，具体涉及 烟草eIFiso4E-T基因突变体的获得及其烟草抗病育种应用。

背景技术

马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是烟草马铃薯Y病毒属(Potyvirus) 的典型成员，PVY主要危害马铃薯、烟草、番茄和辣椒等茄科作物，近年来PVY 已经上升为烟草上的主要病害。PVY在田间由蚜虫非性传播。由于蚜虫发育周 期短、繁殖力强和易产生抗药性，利用化学药剂防治媒介昆虫来治理该病害效 果有限，因此，种植抗病品种是防控PVY最根本、最经济有效的手段。

烟草作为重要的经济作物和植物研究重要的模式作物，有关持久抗PVY资 源鉴定、抗病育种和病原调查鉴定研究较少。其中通过X-射线诱变获得的va基 因抗病资源，已广泛应用于选育烟草抗病品种。烟草eIF4E1-S基因(有的文献 缩写为eIF4E-1，GenBank序列登录号KF155696)缺失会导致烟草产生针对马 铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)的抗性(刘勇等，2013；Julio等，2014)， 但有关持久抗PVY资源鉴定、抗病育种和病原调查鉴定研究较少。未见普通烟 草持久抗PVY的种质资源报道。

在同科作物相邻种植的农田生态下，控制一种作物上PVY的发生不仅有利 于该作物的病害防治，也有利于其他作物的病害治理。

发明内容

本发明的第一发明目的是提供一种eIFiso4E-T基因突变体。第二发明目的 是提供一种eIFiso4E-T基因突变体在选育抗病毒病品种中的应用。

本发明的第一发明目的是这样实现的：

一种烟草eIFiso4E-T突变体，所述烟草eIFiso4E-T突变体的氨基酸序列如 SEQID NO:2或者SEQ ID NO:3所示，与SEQ ID NO:1所示的野生型烟草 eIFiso4E-T的氨基酸序列相比，所述烟草eIFiso4E-T突变体的氨基酸序列第76 位由A突变为T或者第98位由G突变为D。

所述野生型烟草eIFiso4E-T的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示，所述烟草eIFiso4E-T突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO:5或者SEQ ID NO:6所示。

本发明的第二发明目的是这样实现的：

本发明所述的烟草eIFiso4E-T突变体在培育抗病毒病烟草中的应用，所述 病毒病为马铃薯Y病毒。

进一步地，所述应用方法是通过染色体片段导入或者基因导入将eIFiso4E-T 突变位点引入目标烟草，得到包含eIFiso4E-T突变体的烟草，使目标烟草获得 马铃薯Y病毒抗性；所述目标烟草为eIF4E1-S基因缺失、或者eIF4E1-S基因敲 除的烟草；所述目标烟草eIF4E1-S基因缺失的核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示， 所述目标烟草eIF4E1-S基因敲除的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示。