[发明专利]一种用于样本保存及原体核酸快速提取的器具及方法在审
| 申请号: | 202010283672.3 | 申请日: | 2020-04-13 |
| 公开(公告)号: | CN111500404A | 公开(公告)日: | 2020-08-07 |
| 发明(设计)人: | 董灵;胡强 | 申请(专利权)人: | 杭州启棣生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00;C12M1/24;C12M1/12;C12N15/10 |
| 代理公司: | 杭州凌通知识产权代理有限公司 33316 | 代理人: | 王琼 |
| 地址: | 311500 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 样本 保存 原体 核酸 快速 提取 器具 方法 | ||
1.一种用于样本保存及病原体核酸快速提取的器具,其特征在于,所述的用于样本保存及病原体核酸快速提取的器具包括收集反应管、推杆。
2.根据权利要求1所述的用于样本保存及病原体核酸快速提取的器具,其特征在于,所述的收集反应管包括带有刻度的通管,通管一端设有与通管连通的出液管,通管另一端向外延伸形成连接口,收集反应管还包括分别与出液管、连接口适配的盖子。
3.根据权利要求2所述的用于样本保存及病原体核酸快速提取的器具,其特征在于,出液管呈圆柱形,出液管的直径小于通管直径,出液管设有外螺纹,通管内在与出液管连接处设有滤膜,滤膜外径与通管内径相等;连接口设有外螺纹。
4.根据权利要求2所述的用于样本保存及病原体核酸快速提取的器具,其特征在于,所述盖子底部设有密封垫,连接口的盖子在底部设有通孔。
5.一种使用如权利要求1-4中任一项所述的用于样本保存及病原体核酸快速提取的器具进行样本保存及病原体核酸快速提取的方法,其特征在于:
当提取病毒核酸时:
(1)打开第一收集反应管连接口盖子,将样本加入预置有裂解液的管中,盖上盖,震荡混匀,
(2)加热试管到65℃保温10-15min,在75-95℃保温5-10min;
(3)打开连接口盖子,放进第一收集反应管推杆,打开出液管盖子;向下推动推杆,收集液体,即为核酸终产物,然后冷冻保存;
当提取细菌核酸时:
(1)打开连接口盖子,在第一收集反应管内加入样本,样本体积小于最大刻度,加入PBS或医用生理盐水至最大刻度的90%,放入第一收集反应管推杆,打开出液管盖子,使用第二收集反应管收集滤过后的液体;
(2)推入第二收集反应管推杆,打开出液管盖子,滤过的液体做医疗垃圾处理,拿开推杆,盖上出液管盖子,在第二收集反应管内加入裂解液;
(3)盖上连接口盖子,加热试管在65℃保温15-20mins,在95℃保温5mins;
(4)打开连接口盖子,放进第二收集反应管推杆,打开出液管盖子,向下推动推杆,收集液体,即为核酸终产物,然后冷冻保存。
6.根据权利要求5所述的样本保存及病原体核酸快速提取的方法,其特征在于:第一反应收集管的滤膜为聚酰胺材料,孔径为10μm,第二反应收集管为聚四氯乙烯材料,孔径为0.22μm。
7.根据权利要求5所述的样本保存及病原体核酸快速提取的方法,其特征在于:当样本保存在装有裂解液的第一收集反应管时,室温下保存≤8小时,或者4℃保存≤24小时,或者-20℃保存≤1个月。
8.根据权利要求5所述的样本保存及病原体核酸快速提取的方法,其特征在于:当提取病毒核酸时,液体样本体积与裂解液体积比例1-2:1。
9.根据权利要求5所述的样本保存及病原体核酸快速提取的方法,其特征在于:裂解液为尿素8M+蛋白酶K 100μg/ml。
10.根据权利要求5所述的样本保存及病原体核酸快速提取的方法,其特征在于:当样品为粘稠物时,所述裂解液由氢氧化钠0.2M+尿素8M+蛋白酶K 100μg/ml,中和液组成,所述中和液为Tris-HCl。
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