[发明专利]生物体液中代谢物分析用内标液及其应用在审
申请号: | 202010273559.7 | 申请日: | 2020-04-09 |
公开(公告)号: | CN111474202A | 公开(公告)日: | 2020-07-31 |
发明(设计)人: | 王峥;黄慧英;连文华;徐庆妍;李健 | 申请(专利权)人: | 集美大学;厦门大学 |
主分类号: | G01N24/08 | 分类号: | G01N24/08 |
代理公司: | 厦门创象知识产权代理有限公司 35232 | 代理人: | 尤怀成;王凤玲 |
地址: | 361000 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生物 体液 代谢物 分析 用内标液 及其 应用 | ||
本发明涉及一种生物体液中代谢物分析用内标液及其应用,该内标液包含对苯醌。对苯醌作为内标,其氢谱简单、不易挥发,性质稳定,谱峰简单为一个尖锐的单峰,具有非内源性且不与待测物中蛋白结合,同时其NMR信号峰不与体内代谢产物的信号峰重叠,能够与生物体液直接混合进行核磁共振检测进行定量定性;并且通过该内标液能够简便快捷的添加到待测物中后直接进行核磁共振测试,使得生物体液中代谢物的定量方法简便且高精度。
技术领域
本发明涉及生物样品分析领域,具体涉及一种生物体液中代谢物分析用内标液及其应用。
背景技术
近年来,已知生物体内的代谢物不仅受遗传因素的影响,还大大受到环境因素的影响,这些代谢物的分析与基因、蛋白质的分析同样地被作为疾病诊断和健康状态的指标而受到关注。其中,生物体液中代谢物是代谢组之一,自古以来就对其进行定量分析,并且开发出各种各样的分析方法。
目前常用质谱、色谱或核磁的方法对生物体液中代谢物进行定性、定量分析。其中,核磁共振技术是当前代谢组学研究中不可或缺的主要技术,其优势在于能够对样品实现无创性、无偏向的检测,具有良好的客观性和重现性,并且样品处理简单。但由于生物体液中存在大量的蛋白,蛋白与加入的内标物质结合会导致生物体液中小分子内源代谢物的含量的检测受到干扰,并且常用的内标存在着易挥发的问题使得生物体液的核磁共振检测存在着极大的不稳定性。为此,核磁代谢组学中常用的定量方法有两种:一种是不使用内标时,采用归一积分法即binning法,该方法存在着极大的不准确性,只能用于初步提醒是否存在代谢异常;另一种是使用内标,将TSP等常用内标加入到内插管中使内标与样品隔离进行检测,该方法费时费力同时也增加了测样的成本。
因此,现有的生物体液中代谢物的定量方法有待改进。
发明内容
本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此,本发明的一个目的在于提供一种生物体液中代谢物分析用内标液。该内标液具有非内源性且不与待测物中蛋白结合,同时其NMR信号峰不与体内代谢产物的信号峰重叠,能够与生物体液直接混合进行核磁共振检测进行定量定性。
为此,在本发明的一方面,本发明提出了一种生物体液中代谢物分析用内标液,其包含对苯醌。
根据本发明实施例的生物体液中代谢物分析用内标液,其采用高纯度对苯醌作为内标,其氢谱简单、不易挥发,性质稳定,谱峰简单为一个尖锐的单峰,具有非内源性且不与待测物中蛋白结合,同时其NMR信号峰不与体内代谢产物的信号峰重叠,能够与生物体液直接混合进行核磁共振检测进行定量。
另外,根据本发明上述实施例提出的一种生物体液中代谢物分析用内标液,还可以具有如下附加的技术特征:
根据本发明的实施例,所述内标液为利用氘代溶剂配制的对苯醌溶液。
根据本发明的实施例,所述内标液为利用重水配制的对苯醌溶液。
根据本发明的实施例,所述内标液的配制为:1mg对苯醌用1mL氘代水进行溶解,即得所述内标液。
在本发明的另一个方面,本发明还提出了一种生物体液中代谢物的定量方法,该方法使用上述的内标液。
根据本发明的生物体液中代谢物的定量方法,通过内标液能够简便快捷的添加到待测物中后直接进行核磁共振测试,使得生物体液中代谢物的定量方法简便且高精度。
根据本发明的实施例,所述方法利用核磁共振仪进行测定。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出,部分将从下面的描述中变得明显,或通过本发明的实践了解到。
附图说明
图1为对苯醌在氘水中的氢核磁共振谱图;
图2为对苯醌在全血中的氢核磁共振谱图;
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