[发明专利]全面检测非HLA类供者特异性抗体的细胞学方法

权利要求书

1.全面检测非HLA类供者特异性抗体的细胞学方法，包括：

1)封闭靶细胞表面的HLA；

2)将受检样本与HLA被封闭的靶细胞孵育后，清洗去除未结合的所有游离抗体；

3)检测受检样本中与靶细胞表面对应的非HLA抗原结合的非HLA类DSA。

2.根据权利要求1所述的全面检测非HLA类供者特异性抗体的细胞学方法，其特征在于，步骤1)中，所述靶细胞取材于移植物供者或潜在供者来源的器官、组织、细胞或其组分，或上述组织、细胞经体外分离、培养、扩增后的细胞。

3.根据权利要求1所述的全面检测非HLA类供者特异性抗体的细胞学方法，其特征在于，步骤1)中，用于封闭HLA的物质包括HLA特异性抗体、其类似物、抗体片段，或它们的组合。

4.根据权利要求1所述的全面检测非HLA类供者特异性抗体的细胞学方法，其特征在于，步骤1)中，在封闭反应完成后，用已知具有HLA特异性的抗体或抗体的组合，来确认HLA被封闭后，靶细胞无法再结合HLA抗体。

5.根据权利要求1所述的全面检测非HLA类供者特异性抗体的细胞学方法，其特征在于，步骤2)中，受检样本包括移植物受者的体液、移植器官或组织的灌洗或洗脱液。

6.根据权利要求1所述的全面检测非HLA类供者特异性抗体的细胞学方法，其特征在于，步骤3)中，检测非HLA类DSA的方法包括细胞杀伤检测法，标记二抗显色法。

7.根据权利要求6所述的全面检测非HLA类供者特异性抗体的细胞学方法，其特征在于，所述细胞杀伤检测法包括：具有补体激活功能的非HLA类DSA结合到靶细胞表面，在加入补体后，通过抗体的补体依赖性细胞杀伤作用杀死靶细胞，在显微镜下检出经染色的死亡靶细胞。

8.根据权利要求6所述的全面检测非HLA类供者特异性抗体的细胞学方法，其特征在于，所述标记二抗显色法包括：非HLA类DSA结合到靶细胞表面后，再加入能识别受检样本中抗体的类型或其亚型的标记二抗，根据标记二抗所带的特异性标记物检出。

9.根据权利要求6或8所述的全面检测非HLA类供者特异性抗体的细胞学方法，其特征在于，所述标记二抗显色法采用的显色方法包括：酶促化学发光、直接化学发光、电化学发光、免疫荧光。