[发明专利]利用超声波减少小白链霉菌发酵过程菌丝体爬壁的方法在审
申请号: | 202010262861.2 | 申请日: | 2020-04-03 |
公开(公告)号: | CN111534457A | 公开(公告)日: | 2020-08-14 |
发明(设计)人: | 何荣海;向珈慧;马海乐;任晓锋;代春华;孙玲 | 申请(专利权)人: | 江苏大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/04;C12N13/00;C12P13/02;C12R1/465 |
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地址: | 212013 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 超声波 减少 小白链 霉菌 发酵 过程 菌丝体 方法 | ||
1.利用超声波减少小白链霉菌发酵过程菌丝体爬壁的方法,其特征在于按照下述步骤进行:
(1)小白链霉菌菌丝体培养条件
菌种保存方法:将小白链霉菌(Streptomyces albulus,CICC 11022)接种于贝特纳固体培养基(BTN培养基)上,30℃恒温静置培养7d,置于4℃冰箱中备用;
种子液培养方法:用接种环挑取固体培养基上活化后的S.albulus,接入种子液培养基(M3G种子培养基)中,于30℃、180r/min条件下恒温培养24h;
液态发酵培养:配制1.5L发酵培养基装入到发酵罐中,发酵初始pH调为6.8;灭菌完成后,将种子培养液(种龄:对数期24h)以8%的接种量接入并进行发酵;发酵之前先将发酵温度控制在30℃,通风条件设为5.0L/min,转速200r/min,罐压维持在0.05MPa,整个过程溶氧(DO)100%后自然下降;当发酵pH从初始6.8自然降低到4.0以下时,添加12.5%(v·v-1)的NH3·H2O来维持pH至4.0;
(2)超声辅助发酵条件
将活化后的小白链霉菌菌液接种于种子培养基,在接种后的第26~42小时用狭缝式超声波装置在一定条件下进行适度的处理促进其菌丝体分散和产物ε-聚赖氨酸增加;超声波处理条件为温度30℃,采用单一频率超声进行处理,超声波功率密度100~300W/L,处理时长为1~16h,外接循环泵设置发酵液流速为50~100mL/min。
2.根据权利要求1所述的利用超声波减少小白链霉菌发酵过程菌丝体爬壁的方法,其特征在于所述液态发酵培养中的发酵培养基为(g/L):葡萄糖-甘油(1:1,w·w-1)60g,牛肉浸膏10g,(NH4)2SO4 10g,KH2PO4 4g,Mg SO4·7H2O 0.8g,FeSO4·7H2O 0.05g,有机硅消泡剂1.5g,pH 6.8。
3.根据权利要求1所述的利用超声波减少小白链霉菌发酵过程菌丝体爬壁的方法,其特征在于单一频率超声的频率为20、28或60kHz。
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