[发明专利]一种聚肌胞诱导的高效DC-CIK细胞的方法

说明书

本发明涉及免疫技术领域，具体涉及利用聚肌苷酸和聚胞苷酸的共聚物‑聚肌胞(Poly I:C)，聚肌胞是一种是动物体内3型Toll样受体的配体,激活TLR‑3后可介导机体一系列的免疫反应,对机体的特异性免疫和非特异性免疫均有很好的促进作用。本发明用聚肌胞诱导的DC‑CIK具有较对照组更高增殖、高分化(尤其CD3+CD4‑CD8+，CTL)、高杀瘤活性。利用聚肌胞诱导的自体高效DC‑CIK及其它免疫细胞，应用于临床肿瘤患者的治疗。以期恢复或提高肿瘤患者免疫功能，提高机体自身的免疫系统对肿瘤细胞进行杀灭和抑制其增殖。降低肿瘤细胞负荷，清除微小的残留病灶或明显抑制了残留肿瘤/癌症细胞增殖的方式，消除复发、转移的因素，增大治愈的可能性，延长生存时间，提高生活质量。从而达到治疗肿瘤/癌症的目的。

技术领域

本发明涉及免疫技术领域，具体涉及利用聚肌苷酸和聚胞苷酸的共聚物-聚肌胞(polyinosinic:polycytidylic acid copolymer,Poly I:C)，聚肌胞是一种是动物体内3型 Toll样受体的配体,激活TLR-3后可介导机体一系列的免疫反应,如诱导干扰素、白介素、肿瘤坏死因子等细胞因子的分泌,促进单核细胞、巨噬细胞、淋巴细胞及树突状细胞的增殖与成熟等,对机体的特异性免疫和非特异性免疫均有很好的促进作用。

使用聚肌胞加入诱导培养基中协同诱导DC-CIK(巨噬细胞-细胞因子活化的肿瘤杀伤细胞)细胞的增殖与分化，使DC-CIK的杀瘤活性得到大幅提升。以期获得一种聚肌胞诱导的自体高效DC-CIK细胞，应用于临床肿瘤患者的治疗。达到更好的杀灭残余的肿瘤细胞，减少肿瘤复发、转移的因素，增大治愈的可能性，延长患者的生存时间，提高患者生存质量。

背景技术

自体免疫细胞(DC-CIK)应用于肿瘤生物治疗是一种新兴的、安全的及具有显著疗效的肿瘤治疗模式，是一种治疗肿瘤的新型治疗方法。该方法是运用生物学技术和生物制剂，对从肿瘤患者外周血采集、分离的免疫细胞-单个核细胞(包括树突状细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞)进行体外诱导培养和扩增后，回输到病人体内以激发和增强机体自身免疫功能，从而达到治疗肿瘤的目的。肿瘤生物治疗技术是继手术、放疗和化疗之后的第四大肿瘤治疗的方法。

聚肌胞是聚肌苷酸和聚胞苷酸的共聚物，是一种高效的干扰素(IFN)诱生剂,具有广谱抗病毒、刺激吞噬、调整机体免疫、抗肿瘤、抗某些细菌和原虫感染等功能。目前在人类医学上用于治疗肝炎、疱疹病毒感染及一些肿瘤性疾病等方面,显示了其确实的临床疗效。

同时，聚肌胞是动物细胞3型Toll样受体(TLR-3)的配体,聚肌胞激活TLR-3后可介导机体一系列的免疫反应,如诱导干扰素、白介素、肿瘤坏死因子等细胞因子的分泌,促进免疫细胞(包括：单核细胞、巨噬细胞、淋巴细胞及树突状细胞)的增殖与成熟等,促进体内抗体的生成。聚肌胞对机体的特异性免疫和非特异性免疫均有很好的促进作用。

聚肌胞的免疫调节作用：免疫是机体的一种生理性保护功能,是机体识别和消灭外来侵入的任何异物(病毒、细菌等),处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。现代免疫学认为,免疫力是人体识别和排除“异己”的生理反应。机体的免疫能力可分为特异性免疫与非特异性免疫两种,两者是密切联系的。非特异性免疫是生物在种系发展过程中不断与病原微生物斗争中形成的,并可遗传给后代的一种免疫功能，它是与人体的组织特性和生理机能密切相关的。特异性免疫是机体在后天受内外环境因素的刺激而获得的免疫功能。它能识别再次接触的相同抗原,并发生相应的免疫学反应, 它需要在高度分化的组织和细胞的参与下才能完成。

(1)聚肌胞增强免疫细胞的活性；

(2)聚肌胞促进多种细胞因子的分泌；

(3)聚肌胞对Mx蛋白的诱生作用；

(4)聚肌胞促进体内抗体的生成。