[发明专利]一种化学发光免疫分析检测COVID-19的试剂及其检测方法

说明书

本发明提供了一种化学发光免疫分析检测COVID‑19的试剂及其检测方法，采用间接法，在磁性微球上包被COVID‑19抗原，用吖啶酯标记抗人IgG/IgM，以激发液激发吖啶酯发光，从而进行COVID‑19抗体的检测，本发明采用吖啶酯或吖啶磺酰胺类化合物标记技术与超顺磁性纳米微球标记技术相结合的检测方法。超顺磁性纳米微球标记技术是将抗原或抗体包被在纳米微球上的技术，此技术可以将反应的表面积扩大10‑50倍，加快反应的效率；反应过程悬浮于反应液中，属于类均相反应，可以加快反应的速度；连接属于生物活性物质化学连接，包被效率更高，在液态环境下也更加稳定。本发明的检测试剂异性高、灵敏度高、分离简便、快速、无毒、安全稳定，采用试剂进行检测时间短、效率高、稳定性好。

技术领域

本发明涉及体外诊断免疫学测定分析领域，具体的说，涉及一种化学发光免疫分析检测COVID-19的试剂及其检测方法。

背景技术

目前临床上对于COVID-19的检测方法有：PCR扩增法、金标法、酶免法，但是PCR扩增法，操作繁琐，检测时间长，复测总共需要长达12h；金标法和酶免法，灵敏度低，检测范围窄，而且还极大程度上存在着漏检的危险。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对以上不足，提供一种特异性高、灵敏度高、分离简便、快速、无毒、安全稳定的化学发光免疫分析检测COVID-19的试剂，还提供一种采用该试剂的检测方法，该试剂可在化学发光分析仪上自动化的检测COVID-19。

为了解决以上技术问题，本发明采用的技术方案如下：一种化学发光免疫分析检测COVID-19的试剂，其特征在于：所述试剂的制备方法如下：

（1）制备COVID-19超顺磁性纳米微球工作液

1）磁珠洗涤

在室温条件，涡旋混匀装有超顺磁性纳米微球的试剂瓶，涡旋混匀1min，直至磁珠悬液混匀，吸取0.24mL磁珠标记缓冲液C1到包被管中，加入10μL 纳米微球母液，拧紧管盖，涡旋混匀1min；

2）磁珠包被

在室温条件，将包被管置于磁分离架上1min后吸尽液体，从磁分离架上取下包被管，向包被管中加入0.08mL磁珠标记缓冲液C1，拧紧管盖，涡旋混匀1min，向包被管中加入0.02mg COVID-19抗原，拧紧管盖，涡旋混匀1min，向包被管中加入0.16mL磁珠标记缓冲液C2，拧紧管盖，涡旋混匀1min，将混匀后的包被管置于恒温培养箱中，设定温度37℃，设定转速150rpm/min，反应16小时；

3）磁珠洗涤

从步骤2中的恒温培养箱中取出包被管，在室温条件，将包被管置于磁分离架上1min后吸尽液体，向包被管中加入0.4mL磁珠标记缓冲液WB ，溶液温度平衡至室温，拧紧管盖，涡旋混匀；将涡旋混匀后的包被管置于磁分离架上1min后吸尽液体，向包被管中加入0.4mL磁珠标记缓冲液WB ，溶液温度平衡至室温，拧紧管盖，涡旋混匀；将混匀后的包被管置于恒温培养箱中，设定温度37℃，设定转速150 rpm/min，反应7小时；

4）磁珠封闭

从步骤3）中的恒温培养箱中取出包被管，在室温条件，将包被管置于磁分离架上1min后吸尽液体，向包被管中加入0.4mL磁珠标记缓冲液BB，溶液温度平衡至室温，拧紧管盖，涡旋混匀；将涡旋混匀后的包被管置于磁分离架上1min后吸尽液体，向包被管中加入0.4mL磁珠标记缓冲液BB，溶液温度平衡至室温，拧紧管盖，涡旋混匀；将混匀后的包被管置于恒温培养箱中，设定温度37℃，设定转速150 rpm/min，反应16小时；

5）清洗