[发明专利]抗包虫病抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株和抗包虫病抗原单克隆抗体及其应用

说明书

本发明涉及一种抗包虫病抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株和抗包虫病抗原单克隆抗体及其应用，该抗包虫病抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株，分类命名为杂交瘤细胞株XJ10D8D10，已于2017年09月25日保藏于中国典型培养物保藏中心(China Center for Type Culture Collection，简称CCTCC)，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：C201789。本申请对包虫病成虫表膜抗原进行提取,免疫Balb/c小鼠，获得分泌抗包虫病成虫表膜抗原的脾淋巴细胞，将其与SP2/0细胞融合获得分泌抗包虫病成虫表膜抗原的杂交瘤细胞株，从而获得抗包虫病成虫表膜抗原的抗体，该抗体作为诊断试剂，通过粪抗原检测可灵敏的检测出犬的细粒棘球绦虫的感染。为大范围普查检测试剂盒的制备提供必要条件。

技术领域

本申请涉及一种细粒棘球绦虫成虫表膜抗原单克隆抗体及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株；本申请还涉及一种产生单克隆抗体及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株的方法。

背景技术

包虫（棘球蚴）病是由细粒棘球绦虫引发的人兽共患寄生虫病，呈世界范围流行，且流行日趋严重，该病在东欧、环地中海所有国家、中亚、北非及南美洲高发流行。我国也是重灾区。该病的免疫诊断、化疗及终末宿主的诊断及疫苗,是当今包虫病防控工作急需解决的问题和深入研究的主要方向。包虫病在我国分布23个省区，新疆、西藏、甘肃、青海、宁夏、内蒙、四川西部等七省区为高发流行区。包虫病是西部地区农牧民因病致贫和因病返贫的主要疾病之一，同时也是影响畜牧业发展的重要疾病。

包虫病高发国家经过20-100年的控制到最终消灭包虫病，证明包虫病是可以控制的，但与发达国家相比，发展中国家急需简单、有效的防控技术手段控制该病。在包虫病疫苗的研制方面，新西兰和澳大利亚合作研制成功了以绵羊为主的中间宿主用疫苗EG（细粒棘球绦虫）95，该疫苗对绵羊包虫病的保护率达95%以上，但该疫苗不能解决终末宿主感染该虫体后排卵污染环境的威胁，不能解决人被感染的问题，包虫病控制的关键在于终末宿主，因此必须开展细粒棘球绦虫终末宿主的免疫和防控研究。

对包虫病流行病学调查和早期诊断进行研究十分必要，目前包虫病人的诊断主要通过影象技术确诊，现对人和终末宿主犬的免疫学诊断的研究处于初步阶段。从整个包虫病的防治上讲，存在两个方面的问题:（1）终末宿主还无免疫接种的疫苗；（2）还没有简便有效的诊断方法用于广大农牧区对人和犬的早期诊断，诊断方法有待突破，以适应于大范围普查的需要。长期的研究和实践表明要有效的防控该病就要及时发现感染犬并进行有效的治疗处理，这个问题的解决需要早期诊断方法的突破，而有效的诊断试剂的研制是创建简单有效的检测方法及产品的突破口。本发明所公布的EgXJ10单克隆抗体作为诊断试剂，通过粪抗原检测可灵敏的检测出犬的细粒棘球绦虫的感染。为大范围普查检测试剂盒的制备提供必要条件。

发明内容

本申请的目的在于提出一种抗包虫病抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株和抗包虫病抗原单克隆抗体及其应用。

本申请的目的是这样实现的：本申请的一种抗包虫病抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株，分类命名为杂交瘤细胞株XJ10D8D10，已于2017年09月25日保藏于中国典型培养物保藏中心 (China Center for Type Culture Collection，简称CCTCC)，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：C201789。

抗包虫病抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株在制备细粒棘球绦虫检测试剂盒中的应用，为大范围普查检测试剂盒的制备提供必要条件。

本申请还提供了一种抗包虫病抗原单克隆抗体，该抗包虫病抗原单克隆抗体即由上述的抗包虫病抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌获得的。

抗包虫病抗原单克隆抗体在检测细粒棘球绦虫成虫中的应用。

一种细粒棘球绦虫检测试剂盒，包含有所述的抗包虫病抗原单克隆抗体。

一种抗包虫病抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备方法，包括以下步骤：