[发明专利]一种促进间充质干细胞成骨分化的培养基

权利要求书

1.一种促进间充质干细胞成骨分化的培养基，其特征在于，包括胰岛素8~12μg/ml，转铁蛋白0.05~0.2μg/ml，BMP-4 0.05~0.2ng/ml，FGF-2 5~8ng/ml，生长激素1~3ng/ml、谷胱甘肽100~150μg/ml、L-谷氨酰胺 1~3mM，β-巯基乙醇40~50μM，丙酮酸钠1~3mM，非必须氨基酸0.05~0.15mM，纳米三氧化二铁2~10μM，余量为DMEM培养基。

2.根据权利要求1所述的一种促进间充质干细胞成骨分化的培养基，其特征在于，包括胰岛素10~12μg/ml，转铁蛋白0.08~0.2μg/ml，BMP-4 0.1~0.2ng/ml，FGF-2 6~8ng/ml，生长激素2~3ng/ml、谷胱甘肽120~150μg/ml、L-谷氨酰胺 2~3mM，β-巯基乙醇45~50μM，丙酮酸钠2~3mM，非必须氨基酸0.1~0.15mM，纳米三氧化二铁5~10μM，余量为DMEM培养基。

3.根据权利要求2所述的一种促进间充质干细胞成骨分化的培养基，其特征在于，包括胰岛素10μg/ml，转铁蛋白0.08μg/ml，BMP-4 0.1ng/ml，FGF-2 6ng/ml，生长激素2ng/ml、谷胱甘肽120μg/ml、L-谷氨酰胺 2mM，β-巯基乙醇45μM，丙酮酸钠2mM，非必须氨基酸0.1mM，纳米三氧化二铁5μM，余量为DMEM培养基。

4.根据权利要求1所述的一种促进间充质干细胞成骨分化的培养基，其特征在于，所述纳米三氧化二铁为改性纳米三氧化二铁。

5.根据权利要求4所述的一种促进间充质干细胞成骨分化的培养基，其特征在于，所述改性三氧化二铁的制备方法为：取纳米三氧化二铁10~15质量份，正硅酸乙酯20~30质量份，聚偏氟乙烯30~40质量份，三氯化钌0.3~0.5质量份，亚硒酸钠0.1~0.3质量份，硫普罗宁5~8质量份；将纳米三氧化二铁分散于40倍量的无水乙醇中，加入正硅酸乙酯，超声1~2h，升温至60℃，调节pH为碱性，保温反应12h，过滤，取滤渣干燥，得到第一产物；将第一产物同聚偏氟乙烯混合后溶于N-甲基吡咯烷酮，反应20h后真空干燥，得到的第二产物；将第二产物在氩气气氛中煅烧，煅烧温度为400~500℃，煅烧2h后加入碱液中，浸泡10~30min，分离固体产物，干燥，得到第三产物；将第三产物分散到100倍量的去离子水中，高速搅拌下同时滴加三氯化钌和亚亚硒酸钠，滴加结束后，缓慢搅拌，加入硫普罗宁，超声2h，分离、洗涤、干燥得到改性纳米三氧化二铁。

6.根据权利要求5所述的一种促进间充质干细胞成骨分化的培养基，其特征在于，所述纳米三氧化二铁12~15质量份，正硅酸乙酯24~30质量份，聚偏氟乙烯36~40质量份，三氯化钌0.4~0.5质量份，亚硒酸钠0.2~0.3质量份，硫普罗宁6~8质量份。

7.根据权利要求5所述的一种促进间充质干细胞成骨分化的培养基，其特征在于，所述纳米三氧化二铁12质量份，正硅酸乙酯24质量份，聚偏氟乙烯36质量份，三氯化钌0.4质量份，亚硒酸钠0.2质量份，硫普罗宁6质量份。

8.根据权利要求5所述的一种促进间充质干细胞成骨分化的培养基，其特征在于，所述纳米三氧化二铁的制备方法为：取硝酸铁15~25质量份，蔗糖40~60质量份，钛酸四丁酯1~5质量份；将蔗糖溶于20倍量的去离子水中，加入到水热反应釜中，在180~200℃下进行水热反应2~10h，产物用去离子水和乙醇洗涤，80℃下烘干，得到均一的碳球；将硝酸铁溶解于3倍量的乙醇中，加入碳球，超声分散，再加入钛酸四丁酯，搅拌12~24h，反应结束后，将产物用去离子水和乙醇洗涤，100℃下干燥，得到中间产物；将中间产物在空气气氛中焙烧12~24h，焙烧温度为500~600℃。

9.根据权利要求8所述的一种促进间充质干细胞成骨分化的培养基，其特征在于，所述硝酸铁20~25质量份，蔗糖50~60质量份，钛酸四丁酯2~5质量份。

10.根据权利要求8所述的一种促进间充质干细胞成骨分化的培养基，其特征在于，所述硝酸铁20质量份，蔗糖50质量份，钛酸四丁酯2质量份。