[发明专利]一种测定植株中苯扎氯铵的方法

说明书

本发明公开了一种测定植株中苯扎氯铵的方法，采用冷冻干燥+酸化有机溶剂提取+硅藻土净化作为植株样品前处理技术，采用UPLC‑MS/MS作为样品的检测技术，从设备和材料的选取上克服了现有技术的弊端，优化了从提取、净化到检测整个操作流程。该组合技术分析植株中的BAC，具有简便易行、准确、高选择性的技术优势，为建立植株中BAC检测的标准方法提供重要参考，为评估我国经济类和食用类植物农产品中BAC残留现状，和有机食品认证工作提供重要的方法依据，本方法也可应用于实验室内外植株中BAC同系物的检测研究。

技术领域

本发明涉及植物检测领域，具体是一种测定植株中苯扎氯铵的方法。

背景技术

苯扎氯铵(简称：BACs)属于季铵盐类化合物，作为阳离子表面活性剂类广谱杀菌剂，能有效地控制水中菌藻繁殖和粘泥生长，并具有良好的粘泥剥离作用和一定的分散、渗透作用，同时具有一定的去油、除臭能力和缓蚀作用。同时，由于BACs具有良好的消毒效果，被广泛应用于医学消毒，是常见的眼药水、创可贴的主要成分。大规模的生产使用，导致BACs不可避免地进入环境，在市政污水、污泥、地表水和河口沉积物中被大量检出。同时，BACs属于中/高毒化合物，在低浓度即可对细菌、原生动物、虾类产生严重毒性；进入植株后，可被农作物吸收积累，影响农产品安全。欧盟对有机食品认证过程中对苯扎氯铵的残留有严格的控制要求。欧盟委员会法规(COMMISSION REGULATION(EU)No 1119/2014)明确BAC不是批准的植保产品，出于环境安全和人体健康影响，应加强对其的环境监测与监管。然而，国际上关于苯扎氯铵的检测方法并没有获得ISO17025的认可，我国目前也没有建立该物质检测的国家标准。

BACs是由n-烷基键为C₈～C₁₈组成的n-烷基苄基二甲基氯化铵的混合物，其中使用最广泛的是烷基键C₁₂或C₁₄的同系物，CAS号为63449-41-2，一般而言，取代基R基团的碳链越长，水溶性和极性越弱，其中的BAC(C₁₂)属于中等极性和水溶性，易溶于乙醇和丙酮，可溶于水。目前关于植物中BAC(C₁₂)的检测分析鲜有报道。向垒等(2014)以酸化甲醇为萃取剂，以UAE法萃取，以氧化铝柱净化，建立了蔬菜中3种典型季铵盐类化合物(ATMAC(C₁₂)、ATMAC(C₁₆)和DADMAC(C₁₂)的分析方法。该方法如应用于BAC(C₁₂)的检测存在三方面的问题：一是采用柱层析净化的方式，将消耗较多的溶剂洗脱，并且选择中性氧化铝作净化剂其对苯扎氯铵具有保存作用，但洗脱过程要有较高要求，洗脱液过量或不足均会造成目标物损失，使检测回收率偏低；二是样品浓缩过程，由于甲醇自身的理化特性，浓缩过程耗时较长，增加目标物的损失风险；三是采用GC-MS分析，仪器的灵敏度和稳定性较UPLC-MS/MS法差。因此，研究一种高效、直接的测定植株中BAC物质的方法十分必要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种简便易行、准确、高效地检测植株中苯扎氯铵的方法。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：

一种测定植株中苯扎氯铵的方法，包括如下步骤：

(1)除去待检测植株上附着的杂土，以及枯枝烂叶，进行真空冷冻干燥，以去除样品中的水份，然后经研磨得到粉末状或纤维状的植株样品；

(2)将甲酸、乙腈和超纯水混合得到酸性提取溶液，加入到步骤(1)得到的植株样品中，摇匀后恒温超声提取，然后经离心、过滤分离出上清液并于4℃以下保存；

(3)在步骤(2)得到的上清液中加入硅藻土，用涡旋仪将两者充分混合净化，然后离心后用0.22μm滤膜过滤，得到检测液；

(4)采用UPLC-MS/MS测定步骤(3)检测液中的苯扎氯铵含量。