[发明专利]实验室海月水母水螅体的微观饲养方法

权利要求书

1. 一种实验室海月水母水螅体的微观饲养方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1：人工海水配置

配置盐度在2.8%~3.2%范围内的人工海水，持续泵入空气后，静置取上清液；

S2：饵料准备

将配制好的人工海水和丰年虾卵倒入虾卵孵化器中，丰年虾卵的加入量为8~12g/L；向孵化器底部充气，并保持孵化器内温度高于26℃，照明条件下孵化24~48h；静置后，收集位于底部的孵化完成的丰年虾卤虫，并进行多次清洗去除杂质；采用人工海水对丰年虾卤虫进行稀释后，进行投喂或保存，

其中，取出及清洗丰年虾卤虫的方法如下：

照明灯继续照射下，将虾卵孵化器静置10 min，底部沉淀的橘黄色颗粒为孵化完成的丰年虾卤虫，关闭照明灯，打开孵化器的下阀门，使孵出的丰年虾卤虫流出，置于洁净的烧杯中，待卤虫全部流出后，关闭下阀门，从上口倒出漂浮于上层的丰年虾卤虫卵壳并将装置用清水冲洗干净，

第一次流出的丰年虾卤虫中明显带有卤虫卵壳残留，将装有丰年虾卤虫的容器填满人工海水，静置10 min，丰年虾卤虫再次沉淀，快速倾斜烧杯倒去漂浮的丰年虾卤虫卵壳；

剩余的丰年虾卤虫用人工海水冲洗后，静置10 min，而后倒掉上面的水，重复三次后得到干净的丰年虾卵卤虫；

S3：海月水母水螅体转移

暂停饲养缸内的海水循环，将缸内波纹板上的部分水螅体转移至盛有人工海水的实验室器皿内，并清除附着的杂质；将清洗干净的水螅体吸入干净人工海水内，进行状态恢复，选取触手伸展、活力良好的水螅体放入盛有人工海水的六孔细胞培养板或培养皿中，六孔细胞培养板中每孔5~10只水螅体，所述培养皿内放入20~30只水螅体，而后盖上盖子，记录种植日期；

S4：海月水母水螅体附着

将种植水螅体的六孔细胞培养板或培养皿置于20 ℃的恒温生化培养箱中，并且在附着的5 ~ 7天之内不需换水，不需喂食；种植5 ~ 7天后，观察水螅体是否已经附着在板底，若附着量偏少，按照所述步骤3重新进行加种，

观察水螅体是否已经附着在板底的判断标准如下：若水螅体触手伸展，并且用吸管轻轻吹吸水螅体依然附着，则判定该水螅体已经附着在板底；若水螅体触手消失，用吸管吹吸时水螅体飘起，则判定水螅体未附着；

S5：海月水母水螅体喂食

水螅体附着成功后开始正常喂食，用一次性塑料吸管吸取步骤2中的丰年虾卤虫，直接喂到水螅体的触手旁边，每只水螅体3~5只丰年虾卤虫；通过观察保证每个水螅体都可以吃到丰年虾卤虫，喂食后，将水螅体放回培养箱中，进食1.5~3 h；

S6：人工海水更换

水螅体附着后第一周的更换：吸去未进食的丰年虾卤虫，并加入干净的人工海水，加满后加盖继续放入20℃恒温生化培养箱中培养，每两天喂食一次同时换水；

水螅体附着后第二周及之后更换：将六孔细胞培养板或培养皿内的海水和剩余的丰年虾卤虫一并倒出，随后浸没入人工海水中使其充满海水，再将海水倒掉，重复多次后，加满海水，加盖后放入20℃恒温生化培养箱中培养每两天喂食一次同时换水；

S7：传代培养

水螅体快长满培养板时，将水螅体移植到新的培养板中，重复上述步骤3 ~ 6进行水螅体的传代培养。

2.根据权利要求1所述的实验室海月水母水螅体的微观饲养方法，其特征在于：

其中，S1中，配置理论盐度的人工海水后，将充气泵打开并伸入配制好的人工海水中，持续泵入空气2 h，取出充气泵，使用盐度计测定盐度在2.8 ~ 3.2之间，并根据盐度高低适当添加海水素或蒸馏水，静置沉淀5 min后取上清使用。

3.根据权利要求1所述的实验室海月水母水螅体的微观饲养方法，其特征在于：

其中，S2中，丰年虾卵的加入量为10g/L人工海水；而后将充气泵打开伸入至虾卵孵化器内，并采用加热棒对孵化器内的人工海水进行温度控制，同时将照明灯打开朝向虾卵孵化器底部，孵化完成后关闭并取出加热棒和充气泵。

4.根据权利要求1所述的实验室海月水母水螅体的微观饲养方法，其特征在于：

其中，S2中，将干净的丰年虾卤虫和人工海水按体积比为1:3的比例，对丰年虾卤虫进行稀释，稀释好的丰年虾卤虫即可进行投喂，剩余的丰年虾卤虫置于4 ℃冰箱保存，但不能超过两天。