[发明专利]一种7-羟基-8-甲氧基香豆素标准物质的制备方法及其应用

说明书

本发明旨在提供一种7‑羟基‑8‑甲氧基香豆素标准物质的制备方法，依次经乙醇溶液渗漉提取、正己烷萃取分段、柱层析分离再纯化而得。本发明所得到的7‑羟基‑8‑甲氧基香豆素纯品作为标准物质可应用于药品或食品生产流通领域中相关产品中7‑羟基‑8‑甲氧基香豆素成分的检测。本发明提取方法操作简单，提取效率高，提取纯度高达99％以上，纯度能够满足化学对照品的要求。

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及天然中药的分离，具体涉及一种7-羟基-8-甲氧基香豆素标准物质的制备方法及其应用。

背景技术

7-羟基-8-甲氧基香豆素，英文名称:Hydrangetin，CAS:485-90-5，分子式为C₁₀H₈O₄，分子量为192.1，其结构式如下：

关于7-羟基-8-甲氧基香豆素的提取制备方法公开极少，其中有申请号为201110384488.9、名称为《香豆素类化合物的应用及其从瑞香中提取的方法》的中国专利公开了以下提取7-羟基-8-甲氧基香豆素的方法：取瑞香科瑞香属植物的全株，粉碎，用80-95％乙醇加热回流提取.提取液浓缩成乙醇浸膏，用水分散，用乙酸乙酯萃取，浓缩得乙酸乙酯浸膏，经硅胶柱层析，以体积比为50:1的氯仿-甲醇梯度洗脱，在氯仿：甲醇的体积比为25:1的梯度获得A流分、氯仿：甲醇的体积比为10:1的梯度获得B流分、氯仿：甲醇的体积比为8:1的梯度获得C流分，三流分分别经ODS柱层析分离，A流分以体积比为6:4的甲醇-水洗脱、B流分以体积比为1:9的甲醇-水洗脱、C流分以体积比为1:9的甲醇-水洗脱，洗脱液分别用甲醇重结晶,A流分获得瑞香新素、B流分获得7-羟基-8-甲氧基香豆素、C流分获得瑞香素。该申请还同时公开了7-羟基-8-甲氧基香豆素在100mg/mL时，对丙型肝炎病毒蛋白酶NS3/4A的抑制率为72.5％。

另有申请号为200610030920.3、名称为《一种香豆素类化合物在制备抗炎镇痛药物中的应用》公开了以下制备7-羟基-8-甲氧基香豆素的方法：取黄瑞香药材的根皮和茎皮10Kg，粉碎后以95％乙醇渗漉提取，得到提取液50L，浓缩后依次以石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取液浓缩成浸膏。利用硅胶柱色谱、聚酰胺色谱、Sephadex LH-20和制备HPLC等手段对各萃取部位进行系统的化学成分分离和鉴定。结果在乙酸乙酯部位分离得到15个化合物，经结构鉴定，其中1个白色粉末为7-羟基-8-甲氧基香豆素。该申请还同时公开了7-羟基-8-甲氧基香豆素具备较好的抗炎镇痛功效。

上述方法得到的7-羟基-8-甲氧基香豆素，其纯度难以达到中药化学对照品的要求。经查，未见高纯提取7-羟基-8-甲氧基香豆素作为标准物质的方法公开。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：针对上述现有技术存在的不足，提供一种7-羟基-8-甲氧基香豆素标准物质的制备方法。

本发明以如下技术方案解决上述技术问题：

一种7-羟基-8-甲氧基香豆素标准物质的制备方法，包括以下具体步骤:

(1)渗漉提取：取星毛冠盖藤药材，粉碎成粗粉，置渗漉筒中，加6-12倍量50-95％乙醇溶液浸泡12-24小时，渗漉，收集到原药材10-20倍量的渗漉液，渗漉液浓缩成稠膏；

(2)萃取分段：加入相当于稠膏2-5倍量的0-8％乙醇水溶液使其成为混悬液，再加入相当于混悬液1-2倍量的正己烷萃取3-5次，合并正己烷液，回收溶剂，浓缩至稠膏；

(3)柱层析分离：步骤(2)所得稠膏加2-4倍量柱层析硅胶搅拌均匀，水浴上蒸干，粉碎，得混合样品A；混合样品A过硅胶色谱柱，柱层析硅胶为混合样品A的30-100倍量，以正己烷-乙酸乙酯梯度洗脱，收集流分，采用薄层色谱进行检视，合并可检测到7-羟基-8-甲氧基香豆素成分的流分，回收溶剂，浓缩，得7-羟基-8-甲氧基香豆素粗品；