[发明专利]牛血清白蛋白及其制备方法

说明书

本发明公开了一种牛血清白蛋白及其制备方法，涉及牛血清白蛋白制备技术领域。本发明公开的制备方法包括：往牛血浆稀释液加入硫酸铵以使得到的混合溶液的电导率为500mS/cm‑600mS/cm，该方法以混合溶液的电导率作为控制蛋白沉淀的技术参数进行精准的盐浓度控制，大大地提高了终产品牛血清白蛋白的纯度，高达98％以上，并有效减少了杂质，提高了牛血清白蛋白的品质。

技术领域

本发明涉及牛血清白蛋白制备技术领域，具体而言，涉及一种牛血清白蛋白及其制备方法。

背景技术

牛血清白蛋白是生命科学研究，免疫诊断检测常用的生化试剂，在科研和诊断产品开发上需求量很大。建立高纯度牛血清白蛋白的大规模生产方法是满足市场需求的根本途径。

目前生产牛血清白蛋白的方法有利凡诺法、辛酸钠法、低温乙醇法和硫酸铵沉淀法。

利凡诺法：利用利凡诺作为牛血清白蛋白保护剂，通过加热，使牛血清中的其他蛋白沉淀，采用离心或过滤的澄清技术，收获牛血清白蛋白。该方法主要的问题是产品纯度低，最高能达到90％纯度，并且利凡诺成本高，产生大量废弃物。

辛酸钠法：以一定浓度辛酸钠作为牛血清白蛋白保护剂，在控制pH和温度的条件下，通过加热保温，使其他蛋白沉淀，获得牛血清白蛋白。该方法辛酸钠用量较小，不会产生大量废料，牛血清白蛋白纯度也比较高，能达到90％以上，但是不能达到95％以上高纯度，同时在提取过程中引入了高浓度的辛酸盐，增加了牛血清白蛋白中的脂肪酸含量，会对后期实验使用产生干扰，所以需要增加脂肪酸的去除工艺。

低温乙醇法：以低温乙醇作为沉淀剂，对血浆蛋白选择性分批沉淀，最终获得牛血清白蛋白。该方法乙醇用量大，需要专门有机溶剂库房，需要大量耗能制备低温乙醇，同时白蛋白纯度只能达到80％以上，大量乙醇排放不能回收，造成严重环境污染。

硫酸铵法：以一定浓度的硫酸铵作为沉淀剂，对绝大部分杂蛋白进行沉淀，再采用离心或者过滤等澄清手段，分离其他蛋白沉淀，获得纯度比较高的牛血清白蛋白。该方法生产的白蛋白纯度能达到90％以上，但是白蛋白收率偏低，只能达到1.2％左右的收率，并且最终产品的颜色偏红，冻干后产品复溶度差，溶液浑浊，不能满足高浓度白蛋白溶液的实际应用，生产过程中产生了大量的硫酸铵废弃物，造成环境污染。

牛血清白蛋白是在生命科学和诊断检测中最常用的一种生化试剂，近年来生命科学和免疫诊断在快速发展，牛血清白蛋白的需求量迅速增加，需要吨级的供应量才能满足整个行业的需求。国内的血清白蛋白生产企业大都采用以上的方法进行生产，最终产品的外观和理化性质均不能达到精准实验的要求。以至于很多企业完全依靠大量进口牛血清白蛋白才能做出稳定的诊断试剂产品。因此，开发规模化制备高品质牛血清白蛋白的方法是支持科研满足诊断需求的关键因素。

从牛血浆中提取牛血清白蛋白经历了很长的时间和很多的技术改进。目前，能够达到科研和检测应用标准的牛血清白蛋白，必须是纯度高(98％以上)、残留杂质对实验干扰小(低内毒素、低蛋白酶、低脂肪酸)，蛋白稳定性好。血浆复杂的组分对牛血清白蛋白的分离造成了很大的障碍。以往采用的方法为了追求高纯度，难免会通过烈性条件影响白蛋白本身的品质，或者是引入其他杂质。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种牛血清白蛋白及其制备方法，本发明提供的牛血清白蛋白的制备方法能够提高牛血清白蛋白的纯度和收率，减少杂质，有效提高白蛋白的品质。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明提供一种牛血清白蛋白的制备方法，其包括：往牛血浆稀释液中加入硫酸铵以使得到的混合溶液的电导率为500mS/cm-600mS/cm。