[发明专利]一种纯固态发酵的低温淀粉酶的生产方法在审
| 申请号: | 202010194271.0 | 申请日: | 2020-03-19 |
| 公开(公告)号: | CN111304185A | 公开(公告)日: | 2020-06-19 |
| 发明(设计)人: | 胡卫华;邢新荣;包洲;刘钟文 | 申请(专利权)人: | 江苏悠恒生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12N9/62;C12N9/42;C12N9/26;C12N9/24;C12N9/18;C12N1/14;A23K50/60;A23K50/30;A23K20/189;A23K10/18;A23K10/30;A23K10/33;A23K10/37 |
| 代理公司: | 南京天翼专利代理有限责任公司 32112 | 代理人: | 崔立青;王玉梅 |
| 地址: | 226600 江苏省南通*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 固态 发酵 低温 淀粉酶 生产 方法 | ||
1.一种纯固态发酵的低温淀粉酶的生产方法,其特征为:产低温淀粉酶为主,包含蛋白酶、木聚糖酶、果胶酶、纤维素酶等伴生酶系,复合酶系活性量分别为:低温淀粉酶3000Iu/g~5000Iu/g、蛋白酶1000Iu/g~3000Iu/g、木聚糖酶1000Iu/g~3000Iu/g、果胶酶1000Iu/g~3000Iu/g、纤维素酶1000Iu/g~3000Iu/g。
2.一种纯固态发酵的低温淀粉酶的生产方法,包括:步骤一,菌种选取;步骤二,菌种培养;步骤三,培养基选取及称量;步骤四,培养基的发酵处理;其特征在于:
其中在上述步骤一中,在产低温淀粉酶为主,包含蛋白酶、木聚糖酶、果胶酶、纤维素酶等伴生酶系的真菌中挑选出一种(如黑曲霉菌或米曲霉菌等)或几种真菌组合作为生产菌株,菌种接种至斜面培养基于20~40℃下培养2~5天后保存备用;
其中在上述步骤二中,将挑选的一种真菌菌株或几种真菌菌株组合接种至培养瓶中,20~40℃下培养1~3天,然后移入种子罐中进行通风搅拌培养2~5天;
其中在上述步骤三中,按照复合酶系活性量分别为:低温淀粉酶3000Iu/g~5000Iu/g、蛋白酶1000Iu/g~3000Iu/g、木聚糖酶1000Iu/g~3000Iu/g、果胶酶1000Iu/g~3000Iu/g、纤维素酶1000Iu/g~3000Iu/g的要求进行培养基称取和混合;
其中在上述步骤四中,按重量百分比取5~10%的培养菌种接入已消毒的固态发酵培养基中,混匀后加水调整至消毒后含水量为重量百分比50~70%,用乳酸:柠檬酸:富马酸按2:1:1的比重份数进行添加,调节培养基的PH值至4.5~5.5;将培养基逐步放入到底部多孔性托盘内抹平,送入曲房,再自然补给无菌空气,保持环境温度为20~40℃,环境湿度为50~85%的条件下发酵3~7天;每间隔24小时补加一次培养液,其添加量按1%重量比进行均匀喷雾添加;其培养液组成为:糖蜜2%,蛋白胨0.5%,酵母粉0.5%,其余分量为水;发酵成熟的固体料利用低温干燥器进行干燥,直至含水量达到5~12%,再利用粉碎机粉碎至40~60目。
3.根据权利要求2所述的一种纯固态发酵的低温淀粉酶的生产方法,其特征在于,所述步骤四中该培养基的构成为:稻壳粉15~25%,麸皮20~30%,玉米芯8~15%,豆粕10~15%,菜粕4~6%,玉米粉25~35%,糖蜜0.3~0.5%。
4.根据权利要求2所述的一种纯固态发酵的低温淀粉酶的生产方法,其特征在于:所述步骤一中,培养达到生产需要活菌数即单一真菌(如黑曲霉菌或米曲霉菌等)或几种真菌组合≥2±1.5×10的8次方CFU/ml。
5.根据权利要求2所述的一种纯固态发酵的低温淀粉酶的生产方法,其特征在于:所述步骤二中将挑选的一种真菌菌株或几种真菌菌株组合接种至培养瓶中,20~40℃下摇瓶培养1~3天,然后移入种子罐中进行通风搅拌培养2~5天。
6.根据权利要求2所述的一种纯固态发酵的低温淀粉酶的生产方法,其特征在于:所述步骤四中将配好的培养基,按要求消毒、接种、调制均匀后逐步放入到底部多孔性托盘内抹平,送入曲房,再自然补给无菌空气,保持环境温度为20~40℃,环境湿度为50~85%的条件下固态发酵3~7天。
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