[发明专利]一株母乳婴儿源植物乳杆菌BF_15及其应用

说明书

本发明公开了属于生物技术领域的一株母乳婴儿源的植物乳杆菌BF_15，保藏日期为2019年12月27日，保藏编号为CGMCC NO.19252。本发明的植物乳杆菌BF_15分离自河北省保定地区纯母乳喂养婴儿的新鲜粪便，耐酸、耐胆盐和耐受模拟人体消化液性能良好，并且具有免疫调节活性和抗氧化能力；同时能够有效地定植在小鼠肠道内；进一步以葡聚糖硫酸钠诱导小鼠溃疡性结肠炎为模型，菌株BF_15可通过减轻肠道黏膜损伤及炎症细胞浸润，缓解肠道黏膜氧化应激损伤，提高能量代谢水平，调节肠道黏膜免疫功能，促进抑炎因子的表达，达到有效缓解小鼠结肠炎症症状，BF_15还通过调节DSS诱发的肠道菌群结构紊乱来达到预防溃疡性结肠炎目的。

技术领域

本发明涉及微生物领域，具体涉及植物乳杆菌及其应用。

背景技术

肠道是人体最大的免疫器官，当肠道免疫系统发育不成熟或紊乱时，极易诱发免疫相关的肠道性疾病。溃疡性结肠炎(UC)是一种好发于直肠、结肠黏膜及黏膜下层的慢性非特异性炎症。近年来，普遍认为宿主共生的肠道菌群紊乱，免疫功能失调，氧化应激以及炎症介质在UC疾病发生和进展中起到重要作用。目前益生菌的分离和筛选主要来源于传统发酵食品、自然环境、动物和人体等，由于外源益生菌的生长环境与人体胃肠道的环境相差甚远，因此，相比外源益生菌，人源益生菌在耐胆汁、耐酸和耐胃液，胃肠道定植和黏附力，抑菌作用等方面的功能性更具优势，同时具有安全性高、不容易被人体肠道的免疫系统所排斥，具有遗传稳定性，因而更适合作为人类益生菌来使用。

健康婴儿的肠道菌群通常被植物乳杆菌定殖，而这些菌株是通过母乳喂养获得，是容易在肠道粘膜上定殖乳酸菌的重要来源，从而与宿主免疫系统相互作用。从粪便中选出乳酸菌，作为可用于一系列生物医学和技术应用的潜在益生菌发酵剂，被认为是一种很有前途的方法，因为这种细菌群具有与人的长期联系和适应性。总之，鉴于其安全性，益生功能特性以及在不同基质中作为微生物食品培养物的用途，植物乳杆菌，尤其是人体肠道来源，代表了一种极具吸引力的生物制剂，具有巨大的生物技术潜力。

考虑到我国较低的母乳喂养率以及我国婴儿源益生菌菌种资源的匮乏，以中国本土母乳喂养婴儿新鲜粪便为材料，以消化道耐受、抗生素敏感性、Caco-2细胞黏附能力、体外免疫调节和抗氧化能力为评价指标，筛选出具有突出免疫调节能力的乳酸菌，尤其是植物乳杆菌，能够为我国婴儿源益生菌的开发提供优良的菌种资源。

发明内容

本发明旨在解决上述问题，提供一株母乳婴儿源的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)BF_15CGMCC NO.19252。

本发明从河北省保定地区纯母乳喂养婴儿的新鲜粪便中分离出一系列乳酸菌株，并以分离自人体肠道，且能够耐受动物消化道环境，能够在人和动物肠道内定植，起到调节肠道菌群、预防和治疗腹泻、排除毒素和提高机体免疫力等功能特性的标准菌Lactobacillus rhamnos-us GG(ATCC 53103)作为阳性对照菌株(购自于中国普通微生物菌种保藏管理中心)，以耐酸能力、抗人工消化液能力、耐胆盐能力、黏附能力等为指标，筛选出一株具有潜在益生功能的乳酸菌，通过对其16S rDNA进行测序并结合生理生化试验结果初步确定为植物乳杆菌，命名BF_15，同时通过体外试验对该菌株的安全性(抗生素敏感性、有害代谢产物、溶血性等)及益生功能(免疫调节活性和抗氧化能力)进行评估；进一步通过体内试验评价该菌株在小鼠肠道中的定植能力；最后以DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎为动物模型，通过动物实验，测定免疫指标、氧化指标及结肠内容物肠道菌群多样性，检验筛选出的具免疫调节和抗氧化活性乳酸菌的早期摄入对溃疡性结肠炎模型小鼠是否具有通过调节肠道菌群预防肠道炎症的益生作用。

本发明还公开了所述母乳婴儿源植物乳杆菌在制备调节机体免疫力组合物中的应用。

本发明还公开了所述的母乳婴儿源植物乳杆菌在抗氧化组合物中的应用。

本发明还公开了所述母乳婴儿源植物乳杆菌在制备具有通过调节肠道菌群预防溃疡性结肠炎组合物中的应用。