[发明专利]用于北方低温条件下秸秆腐解菌剂的制备方法及应用

权利要求书

1.用于北方低温条件下秸秆腐解菌剂的制备方法，其特征在于：将功能菌枯草芽杆菌、长枝木霉和嗜热毁丝霉分别在液体基础培养基中进行单独培养制备一级种子发酵液，然后在二级发酵培养基中进行二次发酵扩繁制备二级发酵液，将以上三种扩繁后的二级发酵液按1：1：1的比例混合，即为液体腐解菌剂；其具体步骤如下：

1）一级种子液制备

用接种环取活化后的斜面菌种1环，接种于盛有100 mL ~150 mL的基础培养基的三角瓶中，pH 5.8~7.2 、温度 28 ~37℃、150~180r/min 振荡培养24-36小时后获得的发酵液即为一级种子发酵液；

分别制备细菌（LB）和真菌（PDB）液体种子合成培养基，然后将液体培养基放入高压灭菌锅121℃灭菌30 min，冷却后分别在LB培养基中接入枯草芽孢杆菌，在PDB培养基中接入长枝木霉和嗜热毁丝霉，依据细菌和真菌的发酵工艺设置不同的发酵参数，发酵培养后即得液态种子，即一级种子液；制备一级种液培养基配方及培养条件如下：

2）二级种子发酵液的制备

二级发酵液选用的培养基是用玉米加工厂的废弃物质—玉米浆做为氮源代替发酵母粉或者牛肉膏，其制备方法如下：

取振荡培养后的一级种子液，以0.5%的接种量接入到发酵培养基中，在大型发酵设备进行二次发酵培养，扩繁培养即得二级种子培养液，二级发酵培养基配方如下：

3）液体复合腐熟剂的制备

将发酵好的枯草芽孢杆菌、长枝木霉和嗜热毁丝霉二级种子液按照1:1:1的比例进行混合，即为液体复合腐熟剂。

2.秸秆腐解菌剂在北方低温条件下对玉米、水稻秸秆腐解的应用。