[发明专利]靶向CD19和CD20的联合嵌合抗原受体及其应用

权利要求书

1.一种嵌合抗原受体(CAR)，其特征在于，所述嵌合抗原受体的结构如下式I所示：

L-scFv1-I-scFv2-H-TM-C-CD3ζ (I)

式中，

各“-”独立地为连接肽或肽键；

L为任选的信号肽序列；

I为柔性接头；

H为任选的铰链区；

TM为跨膜结构域；

C为共刺激信号分子；

CD3ζ为源于CD3ζ的胞浆信号传导序列；

scFv1和scFv2两者中一个为靶向CD19的抗原结合结构域，另一个为靶向CD20的抗原结合结构域。

2.权利要求1所述的CAR，其特征在于，所述scFv1为靶向CD20的抗原结合结构域，所述scFv2为靶向CD19的抗原结合结构域。

3.权利要求1所述的CAR，其特征在于，所述嵌合抗原受体的结构如下式II所示：

L-V_L1-V_H1-I-V_H2-V_L2-H-TM-C-CD3ζ (II)

式中，V_H1为抗CD20抗体重链可变区；V_L1为抗CD20抗体轻链可变区；V_L2为抗CD19抗体轻链可变区；V_H2为抗CD19抗体重链可变区；“-”为连接肽或肽键；

元件L、I、H、TM、C、CD3ζ如权利要求1所述。

4.权利要求1所述的CAR，其特征在于，所述CAR的氨基酸序列如SEQ ID NO:15或16所示。

5.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的嵌合抗原受体。

6.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求2所述的核酸分子。

7.一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞含有权利要求3所述的载体或染色体中整合有外源的权利要求2所述的核酸分子或表达权利要求1所述的嵌合抗原受体。

8.一种制备CAR-T细胞的方法，其特征在于，所述的CAR-T细胞表达权利要求1所述的嵌合抗原受体，包括以下步骤：将权利要求2所述的核酸分子或权利要求3所述的载体转导入T细胞内，从而获得所述CAR-T细胞。

9.一种制剂，其特征在于，所述制剂含有权利要求1所述的嵌合抗原受体、权利要求2所述的核酸分子、权利要求3所述的载体、或权利要求4所述的宿主细胞，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

10.一种权利要求1所述的嵌合抗原受体、权利要求2所述的核酸分子、权利要求3所述的载体、或权利要求4所述的宿主细胞的用途，其特征在于，用于制备预防和/或治疗癌症或肿瘤的药物或制剂。