[发明专利]一种精确检测含葡萄糖基团的多糖中旋光异构体比例的方法及装置

说明书

本发明属于旋光异构体比例的检测技术领域，特别涉及一种精确检测含葡萄糖基团的多糖中旋光异构体比例的方法及装置。基于待测样品在某种有机溶剂中不发生变旋，但在水相中会完成α到β或β到α的变旋，先对待测样品在有机溶剂和水相中的旋光度进行检测，再通过对比计算得出该待测样品中精确的α:β比例。本发明在不通过液相分离α、β异构体的前提下，能准确、简便地测得α:β比例，且不需要对待测样品进行水份测定或预处理。

技术领域

本发明属于旋光异构体比例的检测技术领域，特别涉及一种精确检测含葡萄糖基团的多糖中旋光异构体比例的方法及装置。

背景技术

由于不同构型的多糖具有不同的物理性质，包括溶出速率、崩解时限等，这种差异在应用于制药工艺时具有非常重要的意义：例如对多糖旋光异构体的研究，能精确掌握旋光异构体比例，有助于深入探知不同构型比例的多糖在药物崩解、溶出乃至被人体吸收时的速率，可以根据临床实际需求精确调整不同的构型比例，使药物达到最好的治疗效果。

发明内容

本发明提供了一种精确检测含葡萄糖基团的多糖中旋光异构体比例的方法：将待测的分子结构中含葡萄糖基团的多糖样品分为两份，一份充分分散于有机溶剂中，另一份充分分散于水中，分别测出所得的溶解有多糖的有机溶剂的旋光度A1以及所得的溶解有多糖的水体的旋光度A2，再计算出该多糖样品中不同构型的旋光异构体的占比，

首先，旋光度的测量与样品溶于溶剂中的浓度有关，但是样品本身存在一个“纯度”问题，即样品一般都是不纯的，多糖样品中不可避免含有水分(如结晶水、自由水)，因此称量到的样品重量不是目标物的实际重量，如果直接将称量值作为目标物的实际重量来参与计算，必然影响检测的准确性，为了解决这一问题，人们一般都是事先对多糖样品进行脱水预处理或进行水份测定，不仅增加了操作工序，而且脱水预处理需要借助高温，会导致多糖样品部分焦化或被氧化，带来了新的误差，

对此，本方案的检测方法中无需对多糖样品进行水份测定或脱水预处理，也能解决上述的“样品中含水分”的问题：

以乳糖为例，乳糖在水相中会发生α构型到β构型或β构型到α构型的变旋，并且乳糖分散于水相中后，无论样品中α构型与β构型之间的初始比例如何，最终都能达到β构型与α构型之间的质量比约为6：4的动态平衡(受到温度等因素的影响，“6：4”这个值会发生微小的浮动，“6：4”是常温25℃下动态平衡时的比例值)，因此本方案中先根据多糖样品于水相中充分分散、变旋后被测到的旋光度A2、以及多糖样品于水相中充分变旋后β构型与α构型之间的质量比为6：4的这个比例值，先列出一个等式：

A2＝(89×0.4+35×0.6)×K (式1)

其中，“89”和“35”分别为纯的α构型和纯的β构型的比旋度，而更重要的是：这里所得到的影响系数K除了涉及从“比旋度”到“旋光度”的常规换算系数(如测试仪器的规格、测试参数等)外，还涉及到“由于样品中含有水分，从而导致了样品分散于溶剂中的实际浓度与投料时预期浓度不同”这一影响，将这些影响因素整合成K这一系数；

另一方面，本方案中检测溶解有乳糖的有机溶剂的旋光度A1：

申请人发现：虽然乳糖在水相中会发生变旋，但是乳糖在一些有机溶剂中是不发生变旋的，申请人在众多有机溶剂中选择DMSO，不仅是因为发现乳糖在DMSO中不发生变旋，同时，乳糖在很多有机溶剂中不溶解或溶解度极低，因此无法有效测得旋光度，但申请人发现，乳糖在常温下能溶解在DMSO中并可形成接近0.5g/mL的稳定溶液，