[发明专利]一种无血清、无异源成分的间充质干细胞培养基及其应用

说明书

本发明公开一种无血清、无异源成分的间充质干细胞培养基及其应用。本发明首先公开了间充质干细胞培养基，包含基础培养基和添加物，所述基础培养基为DMEM/F12培养基，所述添加物为人血小板裂解液和/或人脂质运载蛋白2。本发明进一步公开了间充质干细胞培养基在培养间充质干细胞中的应用。本发明提供的间充质干细胞培养基中无血清和无异源成分，保证了临床应用的安全性；成分简单、批次间稳定性好、细胞体外扩增能力强，符合产业转化要求；能很好地维持间充质干细胞的免疫调节能力和多向分化能力，保证其在临床治疗中发挥有效功能。

技术领域

本发明涉及细胞培养技术领域。更具体地，涉及一种无血清、无异源成分的间充质干细胞培养基及其应用。

背景技术

间充质干细胞是一类具有自我复制更新和多向分化潜能的成体干细胞，广泛存在于胎儿和成人各组织中。除自我更新外，间充质干细胞具有独特的免疫调节和组织再生功能。一方面，间充质干细胞通过与免疫细胞间的相互作用以及旁分泌可溶性因子对免疫细胞进行调控，介导免疫反应平衡，帮助机体形成有利于病损组织细胞修复或再生的微环境。间充质干细胞的免疫调控包括抑制T淋巴细胞活化、降低B细胞活化增殖及抗体分泌、抑制自然杀伤细胞增殖和抑制树突状细胞成熟及抗原呈递。另一方面，间充质干细胞可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肝实质细胞、肌细胞以及神经元等多种功能细胞，参与损伤组织器官的重建。

目前，全球范围内在Clinical trails网站上注册的应用间充质干细胞移植治疗各种疾病的临床研究多达1000余项，包括间充质干细胞移植治疗移植物抗宿主病(graftversus host disease,GVHD)(ClinicalTrials.gov Identifier:NCT00366145)、股骨头坏死(osteonecrosis of femoral head,ONFH)(ClinicalTrials.gov Identifier:NCT01700920)、退行性关节炎(osteoarthritis,OA)(ClinicalTrials.gov Identifier:NCT01809769)、龙贝里综合征(Romberg's Disease)(ClinicalTrials.gov Identifier:NCT02494752)等，均取得了显著疗效。其治疗机制主要依赖于间充质干细胞的免疫调节和组织再生功能。例如，移植物抗宿主病的发生主要与活化的供体T细胞有关。活化的T细胞对抗原发生免疫应答后产生炎症因子IFNγ，而移植的间充质干细胞可响应IFNγ，通过分泌PGE2等免疫调节因子抑制T细胞的增殖，实现对移植物抗宿主病的治疗(Polchert D，Sobinsky J，Douglas G，Kidd M，Moadsiri A，Reina E，Genrich K，Mehrotra S，Setty S，Smith B et al:IFN-gamma activation of mesenchymal stem cells for treatmentand prevention of graft versus host disease.European journal of immunology2008，38(6):1745-1755.)。而将间充质干细胞应用于ONFH、OA、Romberg's Disease的治疗则一定程度上分别依赖于间充质干细胞成骨、成软骨、成脂分化能力。