[发明专利]一种LvCTL4基因及编码的蛋白质、蛋白质的获取方法、表达载体、重组菌和应用

说明书

本发明提供了一种LvCTL4基因及编码的蛋白质、蛋白质的获取方法、表达载体、重组菌和应用，属于基因工程技术领域，所述LvCTL4基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供的LvCTL4基因连接到到载体中，将得到的表达载体电转化到毕赤酵母中，表达得到LvCTL4基因编码的蛋白质，代替目前水产饲料中使用的抗生素，以达到既可预防和治疗动物疾病，又可减少滥用素带来的不良后果的目的。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，尤其涉及一种LvCTL4基因及编码的蛋白质、蛋白质的获取方法、表达载体、重组菌和应用。

背景技术

从古至今，海产品一直倍受人们青睐，它具体高蛋白、高营养价值及低脂肪的特点，同时，富含许多微量元素。随着渔业的不断发展，目前渔业生产过程中也面临着许多问题，其中人们非常关注的问题便是病害问题：各种细菌或者病毒病经常引起鱼、虾大量死亡，从而给养殖业带来巨大经济损失。为了预防和控制鱼、虾病害的发生，养殖户不得不大量使用化学药物进行池塘消毒或者在饲料中添加抗生素类药物。但是大量使用化学药物或者抗生素类药物会带来严重的生态破坏以及食品安全问题，因此，亟待开发可应用于现代渔业的无污染、无残留、安全有效的新型渔药，使之能够部分甚至全部取代化学或抗生素类药物使用的安全有效的抗菌或抗病毒药，这将具有重要的经济价值和社会意义。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种LvCTL4基因及编码的蛋白、蛋白质的获取方法、表达载体、重组菌和应用，本发明提供的LvCTL4基因连接到到载体中，将得到的表达载体电转化到毕赤酵母中，表达得到LvCTL4 基因编码的蛋白质，代替目前水产饲料中使用的抗生素，以达到既可预防和治疗动物疾病，又可减少滥用素带来的不良后果的目的。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种LvCTL4基因，所述LvCTL4基因的核苷酸序列如 SEQ ID No.1所示。

本发明还提供了上述技术方案所述的LvCTL4基因编码的蛋白质，所述蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。

本发明还提供了一种表达载体，将上述技术方案所述的LvCTL4基因连接到酵母表达载体pPIC9K的EcoRI位点和NotI位点之间，得到表达载体。

本发明还提供了一种重组菌，将上述技术方案所述的表达载体转入 Top10克隆菌株中，提取质粒，将所述质粒电转化到毕赤酵母中，得到重组菌。

优选的，所述毕赤酵母包括毕赤酵母GS115。

本发明还提供了一种上述技术方案所述的LvCTL4基因编码的蛋白质的获取方法，将上述技术方案所述的重组菌进行液体培养，将得到的培养液离心，得到上清液，纯化所述上清液中LvCTL4基因编码的蛋白质，得到蛋白质。

本发明还提供了上述技术方案所述的重组菌在制备水生动物抗菌药物、疫苗或饲料添加剂中的应用。

优选的，所述水生动物包括鱼或虾。

本发明提供了一种LvCTL4基因及编码的蛋白、蛋白质的获取方法、表达载体、重组菌和应用，所述LvCTL4基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供的LvCTL4基因连接到到载体中，将得到的表达载体电转化到毕赤酵母中，表达得到LvCTL4基因编码的蛋白质，代替目前水产饲料中使用的抗生素，以达到既可预防和治疗动物疾病，又可减少滥用素带来的不良后果的目的。

附图说明

图1为酵母表达载体pPIC9K结构简图；

图2为LvCTL4序列插入pPIC9K示意图；

图3为序列比对结果；