[发明专利]用于检测样品中抗新型冠状病毒SARS-CoV-2的IgM抗体的试剂盒

说明书

本申请公开了用于用免疫印迹法检测样品中抗新型冠状病毒SARS‑CoV‑2的IgM抗体的试剂盒。本申请还公开了该试剂盒在制备诊断新型冠状病毒SARS‑CoV‑2感染的产品中的用途。本申请提供的试剂盒，具有操作时间短、成本低、对机器依赖性低、可同时利用S蛋白和N蛋白进行检测、检测成本低、检测效率高且检测准确率高等优点。

技术领域

本申请涉及用于检测样品中抗新型冠状病毒SARS-CoV-2的 IgM抗体的试剂盒。更具体地，本申请涉及用于用免疫印迹法检测样品中抗新型冠状病毒SARS-CoV-2的IgM抗体的装置、用于用免疫印迹法检测样品中抗新型冠状病毒SARS-CoV-2的IgM抗体的试剂盒、用免疫印迹法检测样品中抗新型冠状病毒SARS-CoV-2的IgM 抗体的方法、纯化S蛋白抗原和纯化N蛋白抗原的组合或该装置或该试剂盒在检测样品中抗新型冠状病毒SARS-CoV-2的IgM抗体中的用途、以及纯化S蛋白抗原和纯化N蛋白抗原的组合或该装置或该试剂盒在制备诊断新型冠状病毒SARS-CoV-2感染的产品中的用途。

背景技术

2019年12月以来，在世界各地爆发了新型冠状病毒(即严重急性呼吸综合征冠状病毒2，SARS-CoV-2)导致的肺炎疫情，此次流行的非典型肺炎是一种急性呼吸道传染病，其主要通过近距离空气飞沫和密切接触传播，起病急、传播快、病死率高，因此危害极大。

针对上述疫情，如何快速、准确地检测出患者是否患有新型冠状病毒肺炎至关重要。

目前，检测新型冠状病毒SARS-COV-2的一种方法是核酸检测，其主要是基于荧光定量PCR(qRT-PCR)对病毒核酸进行检测，检测基因包括ORF1ab及N基因，除此之外核酸检测还包括基于 CRISPR的快速检测方法Sherlock，其识别基因为ORF1ab及S基因。目前，上述核酸检测方法被定为新冠病毒检测的金标准，但核酸检测目前存在最大的问题是假阴性。造成核酸检测假阴性的原因有很多，包括临床采样的误差。实际上，在临床检验过程中，鼻咽拭子、痰、下呼吸道分泌物、血液、粪便等标本中均可检测出新型冠状病毒核酸，但由于采样方法和采样时间的限制，目前最常用的样本是上呼吸道样本。但是，病毒性肺炎患者在下呼吸道具有更高的病毒载量，所以下呼吸道分泌物的检出率会更高一些。然而，获取肺泡灌洗液等下呼吸道样本操作上要求较高，且易喷溅，传播风险高，比较耗时，最终导致采集到的样本不能反映患者或肺炎疑似患者的真实状况。此外，样本运输的限制也是导致核酸检测出现假阴性的又一原因。各种RNA病毒的核酸由于自降解和生物酶介导的降解，是最难以稳定保存的生物分子之一，其对样本的储存和运输条件要求较高。但目前的检测条件无法做到床旁检测，从采样到实际实验检测须经过漫长的等待时间，样本在一定程度上不能准确反映被检测者真实信息。除此之外，核酸检测还存在耗时长、设备昂贵等问题。

此外，检测新型冠状病毒SARS-COV-2的另一种方法是蛋白检测。目前主要为新冠病毒IgM/IgG抗体检测试剂盒，其应用的方法学主要包括免疫层析(胶体金法)、化学发光、ELISA、免疫荧光等等。但是，胶体金等检测方法无法同时对样本中的S蛋白和N蛋白进行检测，只能对两种蛋白进行单一指标检测，在实验操作、产品和时间消耗方面不占优势。

于此同时，现有的研究表明，在传染过程中IgM是人体免疫系统中先出现的抗体，检测隐性感染新型冠状病毒SARS-COV-2人员体内的IgM抗体具有敏感性高、诊断时间早、能判定量疑似者是否感染等优点，对有效控制新型冠状病毒SARS-COV-2的大规模传播具有重要的意义。

因此，非常需要开发一种用于检测样品中抗新型冠状病毒 SARS-CoV-2的IgM抗体的新型试剂盒，以避免核酸检测中出现的样本采集操作困难、采集后的样本不能准确反应肺炎疑似患者真实病情、样本保存困难等问题，同时具有操作时间短，成本低，对机器依赖性低等优点，并且还可同时对S蛋白和N蛋白进行检测，既降低了检测成本，又明显缩短了检测时间且提高了检测效率和检测准确度。

发明内容