[发明专利]新型冠状病毒重组蛋白S1抗原及双抗原夹心ELISA抗体检测试剂盒

说明书

本发明涉及一种新冠病毒重组蛋白S1及双抗原夹心ELISA抗体检测试剂盒，该试剂盒含包被新冠病毒重组蛋白S1的支持介质、酶标记重组蛋白S1的稀释液以及用于对新冠病毒的抗原抗体反应进行检测的检测试剂、阴性对照、阳性对照。本发明的试剂盒可检测不同动物的血清，只要存在新冠病毒抗体，不论是IgM或IgG抗体，均可以发生特异性反应；可用于新冠病毒溯源检测，追溯新冠病毒自然宿主和中间宿主动物；可用于猪、鸡等家畜、家禽及经济动物是否感染新冠病毒的排查检测；可用于犬、猫等宠物是否感染新冠病毒的排查检测；可用于新冠病毒动物感染模型研究，及基于动物模型的致病机理研究、药物筛选和疫苗评价。

技术领域

本发明涉及一种新型冠状病毒重组蛋白S1抗原及双抗原夹心 ELISA抗体检测试剂盒，属于生物医药领域。

背景技术

冠状病毒(Coronaviridae)属于冠状病毒科冠状病毒属。冠状病毒属的病毒是具外套膜的正链单股RNA病毒，直径约80～120nm，其遗传物质是所有RNA病毒中最大的，感染宿主范围宽，可感染人、鼠、猪、猫、犬、禽类脊椎动物。冠状病毒的一个变种是引起非典型肺炎的病原体，属于RNA病毒。

2003年人严重急性呼吸综合征(SARS)疫情爆发后，科学家们先通过大量检测不同动物血清，发现蝙蝠血清中存在SARS冠状病毒抗体，然后通过病毒分离、基因序列分析最终确定蝙蝠为自然宿主的。因此，针对新冠病毒溯源及其传播途径的研究，当前迫切需要可用于不同动物血清中新冠病毒抗体的高通量检测方法和试剂，以解决不同动物溯源的问题。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明提供了一种新型冠状病毒重组蛋白S1抗原，以及含该重组蛋白的双抗原夹心ELISA抗体检测试剂盒。

本发明涉及一种新型冠状病毒重组蛋白S1，其中，所述新型冠状病毒重组蛋白S1为SEQ ID No.1所示的核苷酸序列编码的蛋白。

本发明涉及一种新型冠状病毒ELISA抗体检测试剂盒，所述试剂盒包括：包被所述新型冠状病毒重组蛋白S1的支持介质、酶标试剂以及用于新型冠状病毒抗原抗体的检测试剂、阴性对照、阳性对照，其中，所述酶标试剂为含酶标记所述新型冠状病毒重组蛋白S1的溶液。

本发明制备的试剂盒不需要样品稀释液，组分简单。该试剂盒可用于新冠病毒溯源检测，追溯新冠病毒的自然宿主和中间宿主动物。

作为本发明的一种实施方式，本发明所述试剂盒中，所述包被新型冠状病毒重组蛋白S1的含量为0.2～1.5μg/ml，优选为0.4～1.0μg/ml，更优选为0.5μg/ml。

所述包被抗原浓度可以为0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、 1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5μg/ml。

作为本发明的一种实施方式，所述支持介质为微量滴定板。

作为本发明的一种实施方式，本发明所述试剂盒中，所述酶标试剂为酶标记新型冠状病毒重组蛋白S1的1∶6000～1∶15000的稀释液，优选为1∶8000的稀释液。

所述酶标记新型冠状病毒重组蛋白S1的稀释倍数可以为1∶6000、 1∶7000、1∶8000、1∶9000、1∶10000、1∶11000、1∶12000、1∶13000、 1∶14000、1∶15000。

作为本发明的一种实施方式，本发明所述试剂盒中，所述酶标试剂经酶标稀释液稀释，所述酶标稀释液为含20％V/V新生牛血清、 0.05％V/V ProClin300、0.05％V/VTween-20的磷酸盐缓冲液。

作为本发明的一种实施方式，本发明所述试剂盒中，所述酶标记的酶为辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶或β-D-半乳糖甘酶。